השיטות העיקריות באבחון המעבדה האטיולוגי של מיקוזה עדיין נותרו שיטות קלאסיות, כולל מיקרוסקופיה של החומר, בידוד של תרבית טהורה של הפתוגן עם זיהויו לאחר מכן. שיטות אימונולוגיותלאבחון יש חשיבות משנית. הם משמשים לזיהוי הפתוגנים המשמעותיים ביותר: פטריות דימורפיות פתוגניות, כמו גם פתוגנים של קריפטוקוקוזיס, קנדידה ואספרגילוזיס. שיטות גנואינדיקציה (פולימראז תגובת שרשרת) הם גם בשימוש מוגבל בגלל חוסר הספציפיות שלהם, אבל הם משמשים בעיקר באבחון של מיקוסים עמוקים ואופורטוניסטיים.
החומר למחקר באבחון מעבדתי של מיקוזה, בהתאם לצורת המחלה, יכול להיות: עור ותוספותיו (שיער, ציפורניים), הפרשות מפצעים ופיסטולות, כיח, דם, נוזל מוחי ושתן, דגימות ביופסיה של רקמות . הנכונות של נטילת חומר פתולוגי קובעת במידה רבה את האפקטיביות של מחקר מעבדה נוסף. במקרה של נגעים בעור, החומר נלקח לרוב על ידי גרידה או שימוש בסרט הדבקה (בעיקר בצורות שטחיות) לפני הטיפול ממוקדים טריים אך מפותחים לחלוטין לאורך הפריפריה, שם נמצאים הפתוגנים הבריאים ביותר.
בעת גילוי פטריות דרמטופיטים, שיער הוא חומר אינפורמטיבי ביותר, שכן אופי הנגע בשיער מאפשר לזהות את הפתוגן. במקרים מסוימים, השימוש במנורת ווד עוזר לקבוע את הנגע. השיער הפגוע יחד עם הקשקשים מוסרים בפינצטה אפילציה. בטריכופיטוזיס שחור מנוקד כרוני, מסירים את השיער מהעור בעזרת מחט לנתח.
ציפורניים נבחרות לאורך כל השכבות, נחתכות עם אזמל חד או מספריים. בחירה יעילה יותר באמצעות מקדחה דנטלית. עם נגעי קנדידה, החומר נלקח באמצעות גרידה מגלגלת הציפורן. החומר הנבחר מועבר למעבדה בשקיות נייר כהות כדי למנוע ייבוש וזיהום במיקרופלורה זרה. חומר המכיל מוגלה מועבר בטביעות גב סטריליות או בצלחות פטרי. כיח נאסף במיכל סטרילי. בדיקת כיח צריכה להתבצע לא יאוחר משעתיים לאחר האיסוף. בעת הארכת זמן המחקר, יש לאחסן את הדגימות במקרר בטמפרטורה של +4 מעלות צלזיוס, אחרת עלולות להתרחש טעויות אבחון עקב הופעת צורות פסאודו-מיצלאליות של תאי שמרים.
דם ונוזל מוחי נלקחים בהתאם לכללי האספסיס. תרביות דם מתבצעות במדיום נוזלי של Sabouraud. כדי למנוע זיהום של דגימות דם, מחקרים חוזרים ונשנים שלהם מתבצעים. נוזל מוחיצנטריפוגה, והמשקעים משמשים למיקרוסקופיה וחיסון.
שתן נלקח בבוקר בצלחת סטרילית, בעוד שיש צורך להימנע מזיהום החומר עם המיקרופלורה של עור הפרינאום. תרביות שתן מבוצעות בשיטות תרבית כמותיות.
באבחון של mycoses, תכשירים הן מחומר מקומי והן מוכתם משמשים. במחקר של תכשירים לא מוכתמים, החומר הצפוף מסולק מראש (מחורץ) עם תמיסת 10-30% KOH (ניתן להשתמש בתמיסות של דימתיל sulfoxide), ולאחר מכן עובר מיקרוסקופ בשיטת "טיפה מרוסקת". כדי לתת ניגוד, התכשירים מוכתמים בתמיסה מימית של מתילן כחול.
צביעה של מריחות קבועות מתבצעת בדרכים שונות: על פי גרם, מתילן כחול, על פי רומנובסקי - גימסה. השיטה האחרונה מאפשרת לראות תאי שמרים קטנים ואת שלבי הפגוציטוזיס. עבור cryptococci, כתם דיו, כתם Southgate עם mucicarmine משמש. פטריות המכילות מלנין (בצבע כהה), למשל בנדנה קלדופיאלופורה, מוכתם על ידי Massa - Fontana (צביעה של מלנין, שהוא חלק מדופן התא). סרה פלורסנטית משמשת לאבחון פתוגנים של מיקוזה עמוקה, פתוגנים של דרמטופיטוזיס, פטריות מהסוג קִמָחוֹן.
בידוד של תרבית טהורה של הפתוגן מאפשר לקבוע את הסוג והמין של הפטרייה, לחקור את תכונותיה ורגישותה ל אנטי מיקרוביאלים. לבידוד וזיהוי של פטריות, משתמשים באמצעי תזונת Sabouraud צפופים ונוזלים, אגר וורט. אמצעי התקשורת הללו מספקים את הצמיחה של רוב הפטריות הפתוגניות והאופורטוניסטיות. בנוסף, המדיום Sabouraud (איור 8.2) ממריץ את תהליכי היווצרות הפיגמנט בפטריות, דבר החשוב לזיהוי.
כדי לדכא את צמיחתם של מזהמים חיידקים, מוסיפים אנטיביוטיקה למדיה: לבומיציטין, סטרפטומיצין, פניצילין, טטרציקלין. לבידוד של פטריות פתוגניות קפדניות, נעשה שימוש במדיה מועשרת בדם ובתמצית לב-מוח. אמצעים מיוחדים משמשים לטיפוח וזיהוי פטריות: מדיום צ'אפק - ליצירת קונידיות בזיהוי פטריות עובש, אגר תפוחי אדמה (תפוחי אדמה-גזר), אגר אורז - לזיהוי סוגי גידול והשגת כלמידוספורים בזיהוי פטריות מהסוג. קִמָחוֹן, אגר גזר (ירקות) - לקבלת מושבות אופייניות להתרבות הפטרייה Trichophyton schonleini,מדיום קשקין - לבידוד פטריות יוצרות פיגמנט. גם סביבות אבחון דיפרנציאליות משמשות, למשל, לזיהוי S. אלביקנס-מדיה או מדיה כרומוגניים, המאפשרים לקבוע את פעילות הפוספוליפאז של הפטרייה.
זמן הדגירה של פטריות נע בין מספר ימים לחודש או יותר. אם יש חשד לפטריות דימורפיות פתוגניות, הטיפוח מתבצע במשך 8 שבועות כדי לתת תגובה שלילית.
חיסונים מתבצעים על מדיה שנשפכה לתוך מבחנות, בקבוקונים וצלחות פטרי. חיסון החומר לפטריות דרמטופיטים מתבצע בו זמנית על מספר מבחנות עם המדיום. חומרים החשודים כמכילים פטריות עובש (ליחה) מחוסנים ב-3 נקודות ומודגרות ב-28 ו-37 מעלות צלזיוס. כדי לפתור את סוגיית היעדר זיהום במהלך דגימת החומר, מתבצעים גידולי בקרה של אוויר לתכולת פטריות עובש בשטחי המעבדה ובמחלקות בהן נמצאים החולים.
כאשר מטפחים פטריות במעבדה מיקולוגית, נצפים אמצעי בטיחות דומים לאלו במעבדות בקטריולוגיות. עבודה עם עובשים ומיקוטוקסינים על מנת למנוע אלרגיה מתבצעת על ידי צוות בחדרים ארגזים בתחבושות גזה או בקופסאות שולחניות עם מכסה מנוע פליטה. עבודה עם תרבויות השייכות לקבוצת הפתוגניות II (פטריות דימורפיות פתוגניות) אפשרית רק במעבדות מיוחדות.
זיהוי מינים פטרייתיים מתבצע על בסיס מכלול של תכונות תרבותיות, מורפולוגיות ואחרות. הראשונים כוללים את המורפולוגיה של המושבה, צבעה וגודלה כאשר היא מעובדת על גבי מדיה מיוחדת, מבנה הקצה והמרכז, אופי פני השטח, נוכחות ואופי אברי הרבייה, השניים - תכונות המיקרוסקופיות. מבנה התפטיר, המבנה, הצורה והגודל של אברי הרבייה - קונידיופורים, קונידיות, כלמידוספורות, ארתרוספורות וכו'.
נוצרות פטריות סוגים שוניםמושבות על חומרי הזנה מוצקים. מדענים ממכון G. Venter (ארה"ב), תוך התחשבות ביכולתן של פטריות לשחרר חומרים פיגמנטים לתוך המדיום, יצרו "עץ חג המולד" במדיום התזונתי (איור 8.3).
אורז. 8.3. "עץ חג המולד" של פטריות (למעלה: Talaromyces stipitatus; עץ Aspergillus nidulans;קישוטים: Penicillium marneffei;גֶדֶם: אספרגילוס טראוס)
ליכולות האנזימטיות וההטמעות של תרבויות יש חשיבות רבה בזיהוי שמרים (פטריות דמויי שמרים). כיום משתמשים במערכות בדיקה מסחריות לזיהוי פטריות נפוצות הגורמות למחלות בבני אדם ובעלי חיים: BBL Mycotube, API 20С bio Merieux וכו'.
הבסיס לאבחון מחלות פטרייתיות הוא בדיקה מיקרוסקופית של תכשירים שהוכנו מהאזורים הפגועים של העור והציפורניים. עם זאת, התמונה המיקרוסקופית עבור סוגים שונים של מיקוזה דומה: נבגי פטריות ותפטיר מחיצה מסועף בקוטר 4-7 מיקרומטר נראים בקשקשי העור ובציפורניים. לכן, הסוג והמין של הפטרייה ברוב המקרים אינם ניתנים להגדרה על פי התמונה המיקרוסקופית בקשקשת העור או בשריטה מהציפורן. כדי לזהות את הפתוגן, תרביות מבוצעות על חומרי הזנה, לרוב על המדיום של סבורו.
אפידרמופיטוזיס.שכבת הקרנית של העור, לרוב כפות הרגליים, והציפורניים נפגעות גפיים תחתונות. השיער אף פעם לא מושפע. כתמים או פסים צהובים מופיעים על הציפורניים, ואז מתפתחת היפרקרטוזיס (עיבוי הציפורניים), דפורמציה והרס שלהם. קילוף למלרי של הסוליות וקפלים בין-דיגיטליים, אדמומיות מופיעה על עור הרגליים. לפעמים נוצרות שלפוחיות, תפרחת חיתולים, סדקים. המחלה מלווה בגירוד, צריבה, כאב.
בְּ בדיקה מיקרוסקופיתגרידות, קשקשים, כיסויים של שלפוחיות נקבעים על ידי חוטים מפולגים מעט של תפטיר בקוטר של 3-5 מ"מ, חלק מהחוטים מתפרקים לנבגים עגולים ומלבניים.
טריכופיטוזיס.זוהי מחלה פטרייתית של העור ותוספותיו עם נטייה מסוימת להשפיע על השיער [lat. trichosשיער + פיטוןפִּטרִיָה]. על הקרקפת מופיעים נגעים רבים בקוטר של כ-1.5 ס"מ. העור עליהם בצקתי, היפרמי, מכוסה בקשקשים. השיער במוקדים מתנתקים ברמה של 2-3 מ"מ מעל פני העור, ומכאן השם "גזזת".
בדיקה מיקרוסקופית מגלה תכונה בולטתפטריות ממין Trichophyton - סידור הנבגים שלהן בשרשראות. בהתאם למאפיינים של פטריות, ישנם:
Endothrix (הגורם הסיבתי לטריכופיטוזיס שטחי). פטריות צומחות בתוך השיער, ומשנות באופן דרמטי את המבנה שלה. השיער כולו מלא (ממולא) בשורות מקבילות של שרשראות המורכבות מנבגים גדולים מעוגלים או מרובעים;
Ectothrix (הגורם הסיבתי של טריכופיטוזיס עמוק), שבו השיער עטוף במעטפת של נבגים קטנים או גדולים המסודרים לאורך הציר בשרשראות.
Favus - גלד.שיער ועור מושפעים, לעתים רחוקות יותר ציפורניים. השיער הופך דק, עמום, "אבקתי", כמו פאות ישנות, אבל לא נשבר. נגעי עור מאופיינים בהופעת קרום צהוב-אפור (סקוטים) עם קצוות מוגבהים דמויי צלוחית.
בדיקה מיקרוסקופית מגלה בועות אוויר בתוך השיער הפגוע.
מיקרוספוריה.העור והשיער מושפעים. בנגעים השיער מתפרק ברמה של 6-8 מ"מ מעל פני העור. כריכות לבנבן נראים מסביב לגדמים הנותרים.
בדיקה מיקרוסקופית של השיער הפגוע מראה נבגים הממוקמים מסביב ובתוך השיער בפסיפס (באקראי). הם קטנים מאוד (1-3 מ"מ), ומכאן שם המחלה. אבחון של microsporia נעזר בזוהר הזוהר האופייני של השיער.
בדיקה מיקרוסקופית מגלה תאים ניצנים מעוגלים, לרוב בצורה של אשכול ענבים.
מיקוסים עמוקים (עובש).נפוץ יותר כמו מחלות מקצוע במפעלי ייצור אנטיביוטיקה, עובדים חקלאיים במגע עם תבואה עובשת, חציר, קומפוסט וכו'. לסוכן הסיבתי של פניצילוזיס (פטריית מברשת) יש תפטיר מחוספס, רחב ומפריד, המסתיים במברשת. לסוכן הסיבתי של רירית יש תפטיר רחב, לא ספוג, המסתיים בשקית עם נבגים. הגורם הסיבתי של אספרגילוזיס (עובש שטיפה) נמצא לעתים קרובות על פירות עובשים, לחם. יש לו תפטיר מחיצות גס, המסתיים בהרחבה שממנה משתרעים חוטים עם נבגים, המזכירים מזלף עם זרמי מים.
אקטינומיקוזיס.נגרמת על ידי סוגים שונים של פטריות קורנות. הוא מאופיין בהיווצרות של מסתננים צפופים על העור, הריריות והאיברים הפנימיים, המועדים לנשימות ופיסטולות. גרגרים צהובים קטנים עם קצה זוהר אופייני נראים בפריקה של פיסטולות - actinomycete drusen. הכנות למיקרוסקופיה מוכנות מהפרשת פיסטולות וליחה.
בהגדלה נמוכה, הדרוזן של הפטרייה הזוהרת נראה כמו תצורות מעוגלות צהבהבות עם אמצע אמורפי בהיר וצבע כהה יותר לאורך הקצוות. בהגדלה גבוהה, נימים של תפטיר נקבעים במרכז הדרוזן, ונפיחות בצורת צלוחית לאורך הפריפריה. כאשר צובעים על ידי גראם, חוטי התפטיר הם G+, והקונוסים הם G-.
4402 0
למרבה הצער, גם כעת ניתן לקבוע כי האבחנה של מחלות פטרייתיות היא לעיתים קרובות בטרם עת (אזורים של שיער דליל, קילוף טועים לעתים קרובות כ"קשקשים", "יובש"). יחד עם זאת, תחושות סובייקטיביות (גירוד, כאב וכו') לרוב אינן מתרחשות בנגעים, ובשל כך החולים אינם הולכים למומחה במשך זמן רב.
שינויים בציפורניים (מכוערים, מתפוררים, דלילות) נחשבים כ"אוניכודיסטרופיה" לאחר חבורה, כוויות קור וכו'. יחד עם זאת (אפילו נגעים בודדים, כולל ציפורניים) יכולים להוביל להיווצרות של מבנה אלרגי של הגוף, להשפיע על כלי הדם והלימפה, וכו ' יחד עם זאת, החולים נשארים ללא הגבלת זמן מקור להתפשטות של זיהום פטרייתי. בהקשר לאמור לעיל, אבחון מעבדה בזמן של מיקוזה והאפשרות לטיפול מוקדם הם תמיד רלוונטיים.
מגוון הווריאציות הקליניות של מחלות פטרייתיות, המצויות בעיקר בבני אדם, כמו גם תכונות המיקרוביולוגיה, המורפומבנה, הפרמטרים האימונולוגיים ואחרים של מינים (וזנים) שונים של פטריות, הובילו לנוכחות של מספר לא מבוטל של שיטות לאבחון. mycoses; יש לציין כי השיטות הזמינות משתפרות ללא הרף ויש להן הטיה מוזרה לבדיקות אימונולוגיות ומולקולריות (לאחרונה יחסית).
מצד שני, מחקרי תרבות עדיין "בקטגוריה של סטנדרטים קרובים לזהב" ומשמשים לאשש תוצאות מפוקפקות של מחקרים אחרים; יש דעה כי השילוב של שיטות גנטיות תרבותיות ומולקולריות במקרה של צורות "מוטלות בספק" של מיקוזה בתוכנית האבחון (במיוחד אלה המופצות, על רקע דיכוי חיסוני של כל בראשית, עם נגעים איברים פנימייםוכו') היא אחת הדרכים האמינות ביותר לרשום את האופי המיקוטי של התהליך.
עם זאת, אין להזניח את השיטות ה"ישנות", בפרט בקטריוסקופיה (במיוחד במהלך הבדיקה הראשונית), במיוחד מכיוון שבפרקטיקה היומיומית "אימות" מיקרוסקופי של מיקוזה במוסדות דרמטולוגיים רבים נמצא בשימוש נרחב ביותר בהשוואה לבדיקות אחרות.
לאור הגידול המשמעותי במספר ביטויים אלרגייםעל העור (ולפעמים הקרביים) - עם מהלך ארוך, כרוני, מחמיר מעת לעת של מיקוזה (עור, ציפורניים וכו'), רצוי להקים בדיקות אלרגולוגיות לזיהוי מידת הרגישות של הגוף, כולל, עם זיהום פטרייתי-חיידקי משולב; עובדה זו עשויה להשפיע על הפרטים הספציפיים של הטיפול בחולה מסוים - למשל, לקבוע את המרשם הרציונלי של תרופות אנטי-מיקוטיות וסוכני חוסר רגישות וכו'.
באופן מסורתי, האבחנה המשוערת מחלה פטרייתיתמבוסס על ביטויים קליניים ומאושר על ידי בדיקות מעבדה.
בחלק זה של הספר, אנו מציגים בקצרה את השיטות הבסיסיות לרישום מיקוסים (ללא קשר למיקומם), תוך התחשבות ב"סוג המחקר והחומר שנלקח". יצוין כי הפולימורפיזם של הביטויים הקליניים של מיקוזה (כולל אלה עם מרכיב אלרגי) קובע את מגוון החומר הפתולוגי שיש לחקור. במקרה זה, הצלחת החיפוש אחר אלמנטים של הפטרייה תלויה בלכידתה הנכונה.
אז, האזור ההיקפי של פריחות אדומות-קשקשיות, לעיתים קרובות, עשיר יותר בתפטיר, נבגי פטריות; על האזורים השעירים של הנגע, שיער מעוות, לבנבן, דהוי, עמום או שברייהם - לוקחים "גדמים" (רצוי לשלוט בדגימת השיער עם מנורת ווד). מיומנויות מסוימות דורשות איסוף של חומר (באמצעות מחט) ממה שנקרא. "נקודות שחורות" - קונוסים קרניים כהים בפיות הזקיקים.
בתרגול יומיומי נבדקים בדרך כלל פתיתי עור (נאספים על ידי גרידה, מריחה, באמצעות סרט דבק), גרידה של ציפורניים שהשתנו, אזור היפר-קרטוזיס תת-ריאה וגם ריריות ניתנות להסרה. על פי האינדיקציות, נבדקים ליחה, נוזל שטיפה, שתן (במטופלים ללא צנתור שַׁלפּוּחִית הַשֶׁתֶן); שתן משתנות, לא ניתן לקחת סירי מיטה למחקר.
דם הוא גם בעל ערך אבחנתי (למחקרי תרבות, כמו גם ELISA, PCR), נוזל מוחי ושדרה ונוזלי גוף אחרים (פלורלים, תוך מפרקיים, תוך צפקיים - כולל כאלה שנאספים בשאיבה או ניקוז); במקרים מסוימים (בהתאם לאבחנה המקומית), יש חשיבות מרה, צואה, נקודות של מורסות תת עוריות, הפרשות פיסטולה (במיוחד עם מיקוז עמוק). אפילו בדיקות אבחון פשוטות דורשות עמידה מדויקת במספר תנאים.
השיטות הבאות משמשות כיום לאבחון מחלות פטרייתיות:
- מיקרוסקופיה; מבוסס על זיהוי הפתוגן בחומר הבדיקה, כולל. ברקמות אנושיות;
- מחקר תרבותי ולאחריו בדיקה מיקרוסקופית של התרבות הפטרייה;
- בדיקה היסטולוגית (למשל עם מיקוז עמוק);
- שיטות חיסוניות ומולקולריות.
אבחון מיקרוסקופי
אבחון מיקרוסקופי התאפשר עם הופעתן של טכניקות אופטיות מיוחדות, ולאחר מכן, טכניקות מיקרוסקופיות אלקטרוניות, שאיפשרו לחקור בפירוט את המבנה האולטרה של פטריות. במקרה זה יש חשיבות אבחנתית לאיתור יסודות פטרייתיים - חוטי הסתעפות דקים היוצרים תפטיר (תפטיר), גופים מעוגלים (נבגים; הם "איבר" הרבייה של פטריות).אבחון מיקרוסקופי כולל מחקר של תכשירים לא מוכתמים (ילידים) ומוכתמים. שיטה זו, כאמור, נפוצה בעיקר בפרקטיקה דרמטולוגית בשל פשטותה היחסית ועלותה הנמוכה, אך מצד שני היא אינה רגישה מספיק, היא מצריכה ניתוחים חוזרים במקרים מסוימים, אישור בשיטות אחרות.
לכן, במחקר של תכשירים לא מוכתמים, בנוסף ליסודות הפטרייה, ניתן לזהות אפיתליוציטים, תאי דם, מזהמים שונים מ סביבה חיצונית, אשר מקשה על החיפוש אחר הגורם הסיבתי של מיקוזה, דורש "הכנה" נוספת של החומר - מה שנקרא. "מאיר" אותו (מריחה), ריכוז, דילול וכו'.
עם זאת, מיקרוסקופיה ישירה סמים מקומייםמאפשר לך לאבחן במהירות מיקוזה, לקבוע איזו חומר תזונתי (במידת הצורך) צריך להיות מחוסן עם החומר, יש דעה כי התוצאה החיובית שלה יכולה להישאר האישור המעבדתי היחיד של מיקוזה עם תגובה שלילית בתרבות (A.Yu. Sergeev) , Yu.V. Sergeev, 2003).
בין האפשרויות השונות ל"הארה" של תכשירים, הנפוצה ביותר היא הוספת KOH או NaOH לחומר הבדיקה (משמש לעתים קרובות יותר לאיתור פטריות בפתיתי עור, שיער, וכן מספר פתוגנים של מיקוזה עמוקה בליחה , דגימות ביופסיה).
למריחה של הקשקשים שנמחצו והונחו על שקף זכוכית, מתבצעת תמיסה של 10-20% של סודה קאוסטית (או אשלגן) - 1-3 טיפות, למשך 10-20 דקות; התכשיר נלחץ קלות עם כוס כיסוי, למריחה מהירה יותר, הוא מחומם על להבה עד להופעת אדים. הצפייה מתבצעת תחילה בהגדלה נמוכה, ולאחר מכן בהגדלה גבוהה (מערכת יבשה).
תכשיר שהוכן כהלכה, שלא היה נתון להשפעות מכניות, תרמיות וכימיות גסות, מציג תמונה של מסה הומוגנית המורכבת מאפיתליוציטים, תוצרי ריקבון תאי של יסודות הפטרייה - חוטי תפטיר ונבגים.
שיער שעבר שינוי מונח על שקף זכוכית עם 10-30% אלקלי ומטופל באותו אופן, אך ארוך יותר - מ-20 דקות עד 3-4 שעות. עם תכולת פיגמנטים שופעת, מומלץ להלבין את השיער ב-5%. תמיסת מי חמצן מראש. הם מייחסים חשיבות לאיתור אלמנטים פטרייתיים, כמו גם למיקומם ביחס לשיער.
הכנת חומר מציפורניים שהשתנו פתולוגית (רצוי אבקה עדינה המתקבלת על ידי גרידה מעומק הפוקוס) מתבצעת באופן דומה, אך באמצעות 30% נתרן הידרוקסיד, חובה חימום זהיר על להבה לאדים קלים וחשיפה למשך כשעה. (לפעמים עד מספר שעות). אין לאחסן תכשירים שטופלו באלקלי יותר מ-1.5-2 שעות בגלל ה"קלקול" שלהם (התגבשות של המגיב, ירידה באמינות האבחון שנקבעת על פי התמונה המיקרוסקופית).
במקום KOH או NOOH, ניתן להשתמש ב: א) תמיסה של תערובת של KOH עם 15% DMSO; ב) תערובת של פנול (2 חלקים) עם הידרט כלורי (2 חלקים) וחומצה לקטית (חלק אחד); ג) calcofluor white, בעל זיקה לצ'יגין ולתאית; נדרש מיקרוסקופ פלואורסצנטי למחקר (נצפה זוהר כחול או ירוק, תלוי בפילטר בו נעשה שימוש). במחקר של נוזל מוחי (אם יש חשד לקריפטוקוקוזיס), נעשה שימוש לעתים קרובות בצביעת דיו.
Kulaga V.V., Romanenko I.M., Afonin S.L., Kulaga S.M.
מחלות הנגרמות על ידי פטריות או זיהומים פטרייתיים הן בעיה נפוצה. יש מספר מדהים של סוכנים סיבתיים של mycoses.
מדי שנה, מדענים מגלים ומתארים סוגים חדשים של פטריות. למרות זאת, אבחון וטיפול במיקוזות הוא מנגנון מבוסס וברור לאורך זמן.
סוגי מחלות פטרייתיות
בבני אדם, רוב הפטריות משפיעות על הריריות והעור.
מחלות שבהן הגורם להתפתחות המחלה הם פטריות כוללות:
- גַזֶזֶת
- פַּטֶרֶת הַעוֹר
- פטרת ציפורניים
- ססגוני או pityriasis, versicolor
- חזזית שחורה
- סבוריאה
- אספרגילוזיס
שיטות לאבחון מיקוז
אחת השיטות הפופולריות ביותר היא אבחון מיקרוביולוגי של מיקוזה.
/IMG_7144_old.jpg)
שיטות אבחון מודרניות מאפשרות לקבוע במדויק איזו פטרייה הייתה הגורם למחלה. בעתיד, זה מאפשר לבחור את מהלך הטיפול האופטימלי. כרגע, ישנן שלוש שיטות עיקריות לאבחון מעבדתי של מיקוזה.
אלו כוללים:
- מִיקרוֹסקוֹפִּי
- תַרְבּוּתִי
- סרולוגי
לכל אחת מהשיטות יתרונות משלה. אבחון תרבותי של mycoses מאפשר לך לקבוע את סוג הפטריות. במקרה זה, ניתן להעריך את רגישות המושבות לתרופות שונות.
שיטה זו תאפשר לך לבחור תרופה יעילה. שיטה זו דורשת זמן רב לזריעה וגידול מושבות.
שיטות מיקרוסקופיות וסרולוגיות לאבחון מיקוזה דורשות פחות זמן להתנהל. בעת השימוש בהם נקבע גם סוג הפתוגן, אך אי אפשר לבדוק את רגישותו לתרופות. במקרים מסוימים, ניתן להשתמש בשיטת אבחון זוהר. שיטה זו פחות נפוצה בשל מורכבותה.
ניתן להשתמש בשיטת הזוהר רק אם השיער מושפע מפטריות. השיטה אינה יעילה לאבחון שלבים מוקדמים. זאת בשל העובדה שאפקט הזוהר יופיע רק כאשר השיער ניזוק מאוד מהפטרייה.
אבחון מיקוזה של כף הרגל
מיקוזה של כף הרגל היא אחת הדרמטומיקוזיס השכיחות ביותר.
מונח זה מקובל להבין כזיהום פטרייתי בעור כף הרגל והציפורניים.
זכור! למחלה יש מהלך חוזר.
במהלך האבחון של מיקוזה של כף הרגל, יש צורך להבדיל ממספר מחלות אחרות. האבחנה של מיקוזה של כף הרגל מבוססת על ביטויים קלינייםובדיקה מיקרוסקופית. אפשר להשתמש בשיטה התרבותית.
טיפול במיקוזות
התפקיד המוביל בטיפול ב-mycoses הוא שיחק על ידי תרופות אנטי פטרייתיות של פעולה מקומית ומערכתית.
הטיפול בתרופות אנטי-מיקוטיות מקומיות מופנה ישירות למוקד המחלה. יחד עם זאת, ההשפעה השלילית על הגוף בכללותו היא מינימלית.
תרופות אנטי מיקוטיות של פעולה מערכתית נקבעות אם:
- תרופות מקומיות נגד פטריות אינן יעילות
- המחלה היא מערכתית
תרופות נגד רגישות ואנטיהיסטמינים נקבעות כאשר מלווים זיהומים פטרייתיים תהליך דלקתיאוֹ תגובות אלרגיות. אם זיהום משני מצטרף ל-mycoses, אפשר לרשום תרופות אנטיבקטריאליות.
טיפול במחלות פטרייתיות חשוב להתחיל בשלבים הראשונים של המחלה. אם התהליך ישן, זה עלול לקחת זמן רב יותר להחלים.
כאשר מופיעים התסמינים הראשונים, פנה מיד לעזרה מהרופא שלנו.
אבחון מדויק של mycoses פולשנילא קל. הסיבה לכך היא לא רק קשיים בהשגת תרבית של פטריות, אלא גם בפירוש תוצאות המחקרים, שכן פטריות, הן שמרים והן תפטיר, עלולות להתיישב בריריות ולזהם את הדגימות הנבדקות. בהקשר זה, האבחון של מיקוז פולשני מבוסס על גישה משולבת, הכוללת לא רק תוצאות של מחקרים מיקולוגיים (תרבותיים) וסרולוגיים (קביעת אנטיגן פטרייתי), אלא גם תסמינים קלינייםזיהום פטרייתי, נתונים משיטות מחקר עזר (הדמיית מחשב או תהודה מגנטית, אולטרסאונד).
קבוצת קואופרטיב אירופה אמריקאית לחקר מיקוז פולשניבחולים מדוכאי חיסון פותחו קריטריונים לאבחון של מיקוזה פולשנית. הם הוצגו בשנת 2001 בוועידה הבינלאומית לתרופות אנטי-מיקרוביאליות וכימותרפיה (ICAAC, שיקגו), ובשנת 2002 בדפוס. נקבעו הקריטריונים למיקוזיס פולשני מוכח, סביר ואפשרי, המומלצים לשימוש במחקרים קליניים ואפידמיולוגיים.
מיקוזה פולשנית מוכחת הנגרמת על ידי פטריות חוטיות: זיהוי תפטיר של פטריות בדגימות ביופסיה או אספירציות עם או היסטולוגית בדיקה ציטולוגיתאו בידוד של תרבית מדגימות שהושגו בתנאים אספטיים מנגע סטרילי בדרך כלל הקשור קלינית ורדיולוגית לזיהום, למעט בדיקת שתן ובדיקות רירית.
מיקוזה פולשנית מוכחת עקב פטריות שמרים: איתור תאי שמרים (פטריות מהסוג קנדידה יכולות ליצור פסאודומיצליום או תפטיר אמיתי) בדגימות ביופסיה או אספירציות, למעט דגימות מהריריות, או בידוד תרבית מדגימות שהתקבלו בתנאים אספטיים ממוקד סטרילי בדרך כלל, אשר על פי תוצאות מחקרים קליניים ורדיולוגיים הקשורים לזיהום, למעט דגימות שתן, סינוסים ורירית, או זיהוי במיקרוסקופיה וצביעה ספציפית (בטיפות דיו, כתם mucicarmine) של תאי שמרים או אנטיגן חיובי של Cryptococcus spp. בנוזל השדרה.
פטריות עקב פטריות חוטיות: בידוד של hemoculture של פטריות, למעט Aspergillus spp. ו-Penicillium spp., כולל Penicillium marneffei, בשילוב עם תסמינים קליניים תהליך זיהומיתואם לפתוגן המבודד.
פונגמיה עקב פטריות שמרים: בידוד של תרבית דם של פטריות מהסוג קנדידה או פטריות שמרים אחרות בחולים עם סימנים קלינייםזיהומים הקשורים לפתוגן זה.
סט של מחקרי אבחון עבור מיקוז פולשני
| חומר ביולוגי נחקר | אינדיקציות, אמצעי תקשורת בשימוש, ערך |
| דָם |
אינדיקציות:
חום מתמשך (4-5 ימים או יותר) על רקע טיפול אנטיביוטי רחב טווח; ה"גל" השני של חום על רקע טיפול אנטיביוטי דגימת דם מווריד לתוך בקבוקונים עבור חיידקים אירוביים* או במדיום סלקטיבי לפטריות, חוזר (2-3 פעמים במהלך היום במרווח של שעה) ערך אבחון: בידוד של פטריות שמרים, פרשנות זהירה בעת בידוד פטריות חוטיות מלבד Fusarium spp. |
| קטטר ורידי |
אינדיקציות:
בידוד שמרים מדם מרכזי או היקפי קטטר ורידילהסיר בכל המקרים של הפרשת פטריות שמרים מהדם לבדיקה מיקולוגית, נעשה שימוש במקטע דיסטלי שהוסר באופן אספטי של הצנתר באורך 5-6 ס"מ. ערך אבחון:
|
| חלק עליון ניתן להסרה דרכי הנשימה, כיח, ספוגיות מקנה הנשימה, סימפונות, נוזל שטיפה ברונכואלוואולרית |
אינדיקציות:
חשד ל-mycoses הנגרמת על ידי פטריות חוטיות או Cryptococcus neoformans; חום ממושך במהלך טיפול אנטיביוטי רחב טווח ונויטרופניה מיקרוסקופיה של דגימות עם calcofluor white (זיהוי תפטיר או פסאודומיצליום); חיסון על המדיום של סבורו; קביעת אנטיגן אספרגילוס בנוזל שטיפה ברונכואלוואולרית בנוכחות מוקדים בריאות, מאפיין אספרגילוזיס פולשני ערך אבחון: בידוד של פטריות חוטיות או Cryptococcus neoformans |
| נוזל מוחי |
אינדיקציות:
תסמינים של דלקת קרום המוח; זיהוי של מיקוד (מוקדים) במוח באמצעות הדמיית תהודה מגנטית או ממוחשבת; תסמינים "מוחיים" על רקע חום ונויטרופניה מיקרוסקופיה עם קלקופלואור לבן, בטיפת דיו; קביעת אנטיגן Aspergillus, Cryptococcus; חיסון על המדיום של סבורו ערך אבחון:
|
| ביופסיות, אספירציות, נוזל צפק, נוזל פלאורלי |
אינדיקציות:
סימנים קליניים ו/או רדיולוגיים של מיקוזה פולשנית; חום במהלך טיפול באנטיביוטיקה רחבת טווח. מיקרוסקופיה עם קלקופלואור לבן, חיסון על המדיום של סבורו ערך אבחון:
|
כנראה מיקוזה פולשניתמאובחן עם שילוב של הקריטריונים הבאים:
סימן אחד מקטגוריית הקריטריונים המיקרוביולוגיים;
סימן אחד מהקטגוריה של "משמעותי" או שניים מקבוצת הסימפטומים הקליניים ה"פחות משמעותיים" של התהליך הזיהומי.
מיקוזה פולשנית אפשריתמאובחן על בסיס שילוב של הקריטריונים הבאים:
נוכחות של לפחות גורם סיכון אחד הגורם להתפתחות של מיקוזה פולשנית;
סימן אחד מקטגוריית הקריטריונים המיקרוביולוגיים או סימן אחד מקטגוריית ה"משמעותיים" (שניים מקבוצת הסימפטומים הקליניים ה"פחות משמעותיים") של התהליך הזיהומי.
הקונספט של " מיקוזה פולשנית אפשרית» אינו מומלץ לשימוש בניסויים קליניים החוקרים את היעילות של תרופות אנטי פטרייתיות. אתה יכול להשתמש במונח זה בניתוח של טיפול אנטי פטרייתי אמפירי, מחקרים אפידמיולוגיים, חקר פרמקו-כלכלה.
בְּ מחקר מיקולוגישאיבות סטריליות או דגימות ביופסיה לוקחות בחשבון לא רק את הבידוד של התרבות הפטריות, אלא גם את זיהוי התפטיר או פסאודומיצליום על ידי מיקרוסקופיה. בהכנות היסטולוגיות, קשה להבדיל בין אספרגילוס ל-Fusarium spp., Sceclosporium apiospermum וכמה פטריות חוטיות אחרות. ל אבחנה מבדלתיש לבצע מחקר אימונוהיסטוכימי עם נוגדנים לאספרגילוס.
בידוד של פטריות שמריםמהדם במחקר אחד לפחות שייך לקטגוריה של מיקוזה פולשנית "מוכחת" ומהווה אינדיקציה מוחלטת למינוי של תרופות אנטי-מיקוטיות מערכתיות בחולים עם נויטרופניה. תדירות הגילוי של פטריות שמרים מהדם נמוכה, אפילו עם קנדידה מפושטת היא 35-50%.
הַחזָקָה תרביות דם חוזרות ונשנותמגדיל את הסבירות לתוצאות חיוביות.
אַחֵר פרשנותתוצאות במקרה של זיהוי פטריות חוטיות בדם. תדירות גבוהה של בידוד של פטריות חוטיות אופיינית ל-Fusarium spp. והוא 40-60%. אספרגילוס נמצא לעתים רחוקות ביותר, ברוב המקרים הוא נחשב כזיהום, למעט אספרגילוס טראוס.
בְּחִירָה אספרגילוס טראוסמדם של חולים עם hemoblastoses עשוי להצביע על אספרגילמיה אמיתית, ובנוכחות של תסמינים קליניים של זיהום, זה הבסיס לרישום תרופות אנטי-מיקוטיות.
קריטריונים למיקוזיס פולשני
| אינדקס | קריטריונים |
| גורמים הגורמים להתרחשות של מיקוזה פולשנית (מאקרואורגניזם) | נויטרופניה (< 0,5*109/л в течение 10 дней)
חום מתמשך יותר מ-96 שעות באנטיביוטיקה רחבת טווח טמפרטורת הגוף מעל 38 מעלות צלזיוס או מתחת ל-36 מעלות צלזיוס וכל אחד מהסימנים הנטיים הבאים: נויטרופניה ממושכת (יותר מ-10 ימים) ב-60 הימים הקודמים, טיפול מדכא חיסוני אינטנסיבי ב-30 הימים האחרונים, מיקוזה פולשנית מוכחת או צפויה בקודמים. נויטרופניה תקופתית או איידס נוכחות של תסמינים של GVHD, במיוחד מקרים של מהלך חמור (דרגה II) או מהלך נרחב של מחלה כרונית שימוש ארוך טווח (יותר מ-3 שבועות) בגלוקוקורטיקואידים ב-60 הימים האחרונים |
| סימנים מיקרוביולוגיים | בידוד התרבות של פטריות חוטיות (כולל Aspergillus spp., Fusaruim spp., Sceclosporium spp. ו-Zygomycetes) ו-Cryptococcus neqformans מ ליחה או נוזל שטיפה ברונכואלוואולרי תוצאות חיוביות של תרבית או בדיקה ציטולוגית (מיקרוסקופיה ישירה) לאיתור פטריות חוטיות משאיפות של הסינוסים הפאראנזאליים זיהוי של פטריות חוטיות או Cryptococcus neoformans בציטולוגיה/מיקרוסקופיה ישירה מליחה או נוזל שטיפה ברונכואלוואולרית אנטיגן אספרגילוס חיובי בנוזל שטיפה ברונכואלוואולרית, בנוזל השדרה ובדגימות דם (לפחות שתיים) אנטיגן קריפטוקוקוס חיובי בדגימות דם זיהוי באמצעות ציטולוגיה או מיקרוסקופיה ישירה של יסודות פטרייתיים בדגימות של נוזלים סטריליים בדרך כלל (למשל, Cryptococcus spp. בנוזל מוחי) שתי תוצאות בדיקה חיוביות לזיהוי תרבית שמרים בשתן בהיעדר צנתר שתן גבישי קנדידה בשתן ללא קטטר שתן בידוד של קנדידה spp. מתרביות דם |
|
סימנים קליניים
דרכי נשימה תחתונות |
חייב להיות קשור למקום שממנו נלקחות דגימות לבדיקה מיקרוביולוגית כל אחד מהסוגים הבאים של חדירות ריאות חדשות ב-CT: סימן הילה, סימן סהר, חלל עם אזורי התגבשות* תסמינים של זיהום בדרכי הנשימה התחתונות (שיעול, כאבים בחזה) חזה, hemoptysis, קוצר נשימה), חיכוך פלאורלי, כל הסתננות חדשה שאינה נכללת בסימנים בעלי משמעות גבוהה; תפליט פלאורלי |
| דרכי נשימה עליונות סימנים בעלי משמעות גבוהה סימנים בעלי משמעות פחותה |
סימנים רדיולוגיים של זיהום פולשני בסינוסים של האף (שחיקה של הקיר או התפשטות זיהום למבנים סמוכים, הרס נרחב של עצמות הגולגולת) נזלת, גודש באף, כיב ברירית האף, דימום מהאף, בצקת periorbital, כאב בלסת התחתונה, כיב נמק שחור או ניקוב של החך הקשה |
| מערכת העצבים המרכזית סימנים בעלי משמעות גבוהה סימנים בעלי משמעות פחותה |
עדות בקרני רנטגן לחשוד בזיהום במערכת העצבים המרכזית (מסטואידיטיס או מיקוד פרמנינגאלי אחר, אמפיאמה חוץ-דוראלית, נגעים מרובים בחומר המוח או חוט השדרה) תסמינים וסימנים נוירולוגיים מוקדיים, כולל התקפים מוקדיים, hemiparesis; הפרעות תודעה, תסמיני קרום המוח, הפרות של ההרכב הביוכימי של נוזל המוח השדרתי וההרכב התאי שלו (בהיעדר פתוגנים אחרים, על פי תרבית ומיקרוסקופיה, בהיעדר תאי גידול) |
בְּ זיהוי בדםאו ביולוגים סטריליים אחרים של פטריות שמרים, יש צורך לבצע זיהוי למין ולקבוע את הרגישות לתרופות אנטי פטרייתיות, כאשר מבודדים פטריות חוטיות (עובש) - רק זיהוי למין, הרגישות אינה נקבעת.
בקלינית תרגולהרגישות של פטריות חוטיות אינה נחקרת עקב חוסר השלמות של הסטנדרטים לקביעת רגישותן של פטריות כאלה לחומרים אנטי מיקוטיים. יתר על כן, רק מחקר אחד הראה מתאם בין Aspergillus spp. ותוצאות טיפול באספרגילוזיס פולשני בחולים עם המובלסטוז. אף אחד מהמחקרים הבאים לא מצא תוצאות דומות.
לאחרונה החלו להופיע דיווחים בודדים על היווצרות עמידות נרכשת של פטריות A. fumigatus ל-itraconazole, voriconazole.
זיהוי פטריות למין, במיוחד המתקבל מלוקוסים סטריליים, נחוץ בעיקר לבחירה של טיפול אנטי-מיקוטי ואנטי-פטרייתי הולם. לפיכך, Candida krusei עמידים לפלוקונאזול ופחות רגישים ממיני שמרים אחרים לאמפוטריצין B; Aspergillus terreus, Scedosporium apiospermum (Pseudallescheria boydii), Trichosporon beigelii, Scopulariopsis spp. עמיד לאמפוטריצין B; Mucorales עמידים ל-itraconazole, voriconazole, קנדידה גלברטה מראה רגישות תלוית מינון ל-fluconazole, ואם סוג זה של פטריות, אפילו זנים רגישים, מבודדים, יש להעלות את המינון של fluconazole (למבוגרים רושמים 800 מ"ג במקום 400 מ"ג). ; Candida lusitaniae עמידים לאמפוטריצין B.
זיהוי פטריות למיןחשוב גם לאנליזה אפידמיולוגית בבית חולים - קביעת גורמי התפרצויות זיהום ואם אפשר, מקור הזיהום. מתוארות התפרצויות של זיהום הנגרמות על ידי פטריות נדירות כמו C. lusitaniae, C. krusei, C. lipolytica.
מבוסס זיהוי מינים של פטריותניתן להניח מיקוזה פולשנית או התיישבות פטרייתית של הממברנות הריריות. לדוגמה, אספרגילוס ניז'ר נוטה משמעותית פחות מאשר אספרגילוס fumigatus לגרום לאספרגילוזיס פולשני בחולים לוקמיה חריפה. בידוד של אספרגילוס ניגר מנוזל שטיפה ברונכואלוואולרי נחשב לרוב כקולוניזציה של דרכי הנשימה, ומליחה - כזיהום מהאוויר ודורש מחקרים נוספים כדי לאשר את האבחנה של אספרגילוזיס פולשני.
מבוסס בידוד של פטריות חוטיותמליחה, נוזל bronchoalveolar, אספירציה של הסינוסים הפרנאסאליים, אפשר רק להניח מיקוזה פולשנית, לא לכלול אותו בקטגוריה "מוכחת". עם זאת, יש לקחת בחשבון תמיד את זיהוי אספרגילוס בכיח, במיוחד Aspergillus fumigatus או Aspergillus flavus, בחולים נויטרופניים המקבלים מח עצם אלוגני. זה דורש החזקה מחדשמחקר מיקולוגי ו טומוגרפיה ממוחשבתריאות. אז, עם נויטרופניה, ההסתברות לגילוי אספרגילוזיס פולשני במקרה של תרבית חיובית של Aspergillus spp. בכיח הוא 80%.
בְּחִירָה Cryptococcus neoformansבחולים מדוכאי חיסון מדרכי הנשימה (שטיפות, שטיפה) הוא משמעותי מבחינה אבחנתית. אם זיהוי פטריות שמרים מנוזלים המתקבלים מדרכי הנשימה (שטיפות מקנה הנשימה, הסימפונות, שטיפה ברונכואלוואולרית) של חולים עם דכאי חיסון אינו חובה, אזי יש צורך בבדיקה לאיתור Cryptococcus neoformans מדגימות אלו.
זיהוי קנדידה בשתןבחולים עם נויטרופניה וחום, זה נחשב בדרך כלל לביטוי של זיהום קנדידלי מפושט.
בזמן אבחוןפולשני להשתמש בהצלחה בבדיקה מסחרית כדי לזהות את מחזור הדם של אנטיגן ספציפי של פטריות Aspergillus spp. galactomann (מרכיב מסיס במים של פוליסכריד של דופן התא של הפטרייה).
גלקטומןניתן לקבוע בשתי שיטות: שיטת האגלוטינציה לטקס (Pastorex Aspergillus, BioRAD) והשיטה בדיקת אנזים חיסונית(Platelia Aspergillus, BioRAD).
יתרון בדיקת אנזים חיסוניתהוא סף נמוך יותר של רגישות לקביעת רמת הגלקטומן בדם - 1 ng / ml או פחות, ושימוש באגלוטינציה לטקס - 15 ng / ml. ערך אבחון הוא קביעת גלקטומן בדם (לפחות 2 דגימות), נוזל מוחי, שטיפה ברונכואלוואולרית. הרגישות של שיטת אנזים immunoassay היא כ-90%, הספציפיות היא 90-99%, אצל מקבלי מח עצם אלוגני נתונים אלו נמוכים יותר ושווים ל-60-70% ו-80-90%, בהתאמה, עקב שימוש מניעתי. תרופות נגד פטריות(תרופות אנטי-מיקוטיות מורידות את רמת הסף של גלקטומן).
ב-40% מהמקרים, איתור גלקטומןבדם לפני ביטויי אספרגילוזיס פולשניים, שנקבעו בבדיקת מחשב של הריאות, וב-70% לפני התסמינים הקליניים של זיהום.
ערך אבחנתי של בדיקת גילוי אנטיגן אספרגילוסיש במקרה שהמחקר יתבצע שוב ושוב. קביעת אנטיגן אספרגילוס בדם צריכה להתבצע עם חום במהלך טיפול באנטיביוטיקה רחבת טווח בחולים עם נויטרופניה פעמיים בשבוע; עם דלקת ריאות המופיעה או נמשכת על רקע טיפול אנטיביוטי; עם זיהוי מוקדים ברקמת הריאה (טומוגרפיה ממוחשבת).
