ניתוח ANF: מטרה, סיווג, פרשנות. גורם אנטי-גרעיני (ANF) סיבות מוגברות של גורם אנטי-גרעיני

מידע כלליעל המחקר

קביעת גורם אנטי-גרעיני (ANF) הוא "תקן הזהב" לאיתור נוגדנים אנטי-גרעיניים (ANA) ולאבחון מחלות אוטואימוניות.

הפתוגנזה של מחלות מערכתיות רקמת חיבור(MCTD) קשור קשר הדוק להפרעות במערכת החיסון וייצור מוגבר של נוגדנים למבנים של התאים של האדם עצמו. נוגדנים עצמיים למרכיבי גרעין התא - נוגדנים אנטי-גרעיניים - מקיימים אינטראקציה עם חומצות גרעין וחלבונים של הגרעין, אנטיגנים ציטופלזמיים, המתבטאים בשינויים דלקתיים ברקמות ובאיברים, כאבים במפרקים ובשרירים, עייפות קשה, ירידה במשקל, עור שינויים. ANA נמצאים ברבים מחלות אוטואימוניות, אך הם האופייניים ביותר לזאבת אדמנתית מערכתית (SLE). ANA נמצאות ביותר מ-90% מהחולים עם מחלות רקמת חיבור מערכתיות; כיום תוארו כ-200 זנים, המאוחדים בשם אחד - גורם אנטי-גרעיני.

בעת קביעת ANF על ידי הקרנה עקיפה, נעשה שימוש לעתים קרובות יותר בקו המושתל של תאי אפיתל אדנוקרצינומה של גרון אנושי HEp-2. תאי HEp-2 הם מצע נוח מאוד למחקר מעבדתי, שכן יש להם גרעינים גדולים וגדלים בשכבה אחת על שקופיות. ANA מזוהים על ידי קישור לאנטיגנים תוך תאיים של תאי HEp-2.

במחקר, תאי אפיתל HEp-2 גדלים על משקפיים, מקובעים ומודגרים בסרום הדם של המטופל. לאחר הסרת הסרום העודף, התאים מודגרים בנוגדנים המסומנים בפלואורססין, ואז נשטפים שוב ונבדקים במיקרוסקופ פלואורסצנטי. במקרה זה, טיטר הנוגדנים וסוג הזוהר נקבעים. טיטר של יותר מ-1:160 נחשב למשמעותי מבחינה אבחנתית. במהלך החמרה של מחלות ראומטיות הוא עולה על 1:640, ובתקופת ההפוגה הוא יורד ל-1:160-1:320. ככל שיש יותר נוגדנים, הטיטר גבוה יותר. בהתאם לסוג הזוהר, ניתן לקבוע מטרות לנוגדנים אנטי-גרעיניים, אשר חשיבות קלינית רבה וקובעת את הטקטיקה של המשך הבדיקה של החולה. העיקריים שבהם הם סוגים היקפיים, גרגיריים (קטנים/גדולים), גרעיניים, צנטרומריים וציטופלזמיים של צביעה גרעינית. לכל סוג של זוהר תכונות אופייניות מאוד המאפשרות להבחין בין וריאנט אחד למשנהו.

צביעה הומוגנית (דיפוזית) קשורה בנוכחות נוגדנים ל-DNA דו-גדילי, היסטונים ואופייני ל-SLE ולזאבת הנגרמת על ידי תרופות.

הארה היקפית נובעת מהתפלגות היקפית של כרומטין בגרעין, קשורה לנוגדנים ל-DNA, והיא ספציפית ל-SLE. סוג זה של זוהר חשוב להבדיל מהצביעה של הממברנה הגרעינית, המופיעה במחלות כבד אוטואימוניות.

צביעה גרגירית (מנומרת, מרושתת) היא השכיחה ביותר והפחות ספציפית; היא מזוהה במחלות אוטואימוניות רבות. אוטואנטיגנים במקרה זה הם קומפלקסים של נוקלאופרוטאין בגרעין (Sm, U1-RNP, SS-A, SS-B אנטיגנים ו-PCNA).

טיטר גבוה מאוד של ANF עם סוג גדול-גרגירי של זוהר מצביע לרוב על מחלת רקמת חיבור מעורבת.

צביעה גרעינית (גרעינית) נובעת מהיווצרות נוגדנים למרכיבי הגרעין (RNA polymerase-1, NOR, U 3 RNP, PM / Scl), מתגלה בסקלרודרמה, מחלת סיוגרן. AHA לעיתים עולה במחלות אנדוקריניות (סוכרת מסוג 1, דלקת בלוטת התריס, תירוטוקסיקוזיס, תסמונת פוליאנדוקרינית), מחלות עור(פסוריאזיס, פמפיגוס), במהלך ההריון, לאחר השתלת איברים ורקמות, בחולים המודיאליזה.

הארה צנטרומרית מופיעה בנוכחות נוגדנים לצנטרומרים של כרומוזומים ואופיינית לצורה של סקלרודרמה - תסמונת CREST.

הסוג הציטופלזמי של זוהר קשור לנוגדנים לסינטטאז tRNA, בפרט ל-Jo-1, האופייני לדרמטומיוזיטיס ולפולימיוזיטיס. סוג זה של צביעה נקבע גם בנוכחות נוגדנים למרכיבים אחרים של הציטופלזמה בדלקת כבד אוטואימונית, שחמת מרה ראשונית.

זיהוי סימולטני של סוגים שונים של זוהר מעיד על נוכחות של סוגים שונים של נוגדנים.

אצל אנשים בריאים, ניתן לזהות פלואורסצנציה עדינה בטיטר נמוך, בינוני או גבוה של AHA, אך בדרך כלל אין לזהות סוגי פלואורסצנטי גס או הומוגנית.

בהתאם לתוצאות ההערכה של סוג הזוהר, מפותחות טקטיקות נוספות לטיפול בחולה ונקבעים מחקרים נוספים להבהרת הספקטרום של ANA.

למה משמש המחקר?

• לאבחון מחלות רקמת חיבור מערכתיות.
• ל אבחנה מבדלתמחלות ראומטיות.
• להעריך את יעילות הטיפול במחלות אוטואימוניות.
• לפקח על מהלך מחלות רקמת חיבור מערכתיות.

מתי מתוכנן הלימודים?

• עם תסמינים של מחלה אוטואימונית (חום ממושך, כאבי פרקים, עייפות, ירידה במשקל, שינוי עור).
• בעת זיהוי שינויים האופייניים למחלות מערכתיות של רקמת החיבור (עלייה ב-ESR, רמה חלבון C-reactive, מתחמי חיסון במחזור).

השתייכות לקבוצת הקולגנוזות הגדולות, המאופיינת בנזק מפוזר לרקמת החיבור וכלי הדם. אבחון מוקדם של פתולוגיה זו הוא בעיה רצינית, שכן SLE יכול להתחיל תחת "מסכה" של מחלות אחרות. מכיוון ש-SLE היא מחלה אוטואימונית, המנגנון שלה ביטויים קליניים, על פי מושגים מודרניים, מוסבר מהעמדות הבאות:

• קומפלקסים חיסוניים במחזור הדם (CIC), הכוללים נוגדנים אנטי-גרעיניים, המופקדים בקישור המיקרו-מחזורי, מובילים להתפתחות וסקולופתיה ונזק לרקמות;
• נוגדנים עצמיים לתאי דם מובילים ללוקו-, לימפותרומבופניה ואנמיה;
• נוגדנים אנטי-פוספוליפידים מובילים להתפתחות של תסמונת אנטי-פוספוליפיד (APS).

שיטות מודרניות של אימונולוגיות אבחון מעבדהמאפשרים לזהות את כל מרכיבי הפתוגנזה של SLE ובכך, בדיוק יוצא דופן, כמעט 100%, לאמת את האבחנה של המחלה. יחד עם זאת, נוכחותם של שינויים כלשהם בניתוחים מאפשרת לפרש אותם רק תוך התחשבות בתמונה הקלינית הפרטנית.

יש לציין כי השיטה הישנה לאבחון SLE על פי הימצאות תאי LE בדם לא עמדה במבחן הזמן, והראתה רגישות וסגוליות נמוכות ביותר, ולכן היא נזנחה. תאי LE אפילו לא נכללים בקריטריונים של SLE.

הסמנים העיקריים של SLE הם:

אינדיקציות למינוי בדיקת דם לסמנים של זאבת אריתמטית מערכתית

• זאבת עורית;
• זאבת רפואית;
• פורפורה טרומבוציטופנית;
• אריתרודרמה;
• נזק חמור לכבד;
• תסמונת CREST;
• polymyositis;
• דרמטומיוזיטיס;
• דלקת מפרקים כרונית לנוער;
• דלקת כבד אוטואימונית;
• כולנגיטיס טרשתית;
• פולינוירופתיה;
• מיאליטיס;

איך ההליך?

דגימת דם מתבצעת מהווריד הקוביטלי על קיבה ריקה בבוקר.

הכנה לניתוח

נוגד קרישה של לופוס

לופוס נוגד קרישה (LA) היא אחת מבדיקות הסקר והאישור החשובות לאבחון של APS. VA נוצרים בגוף כתוצאה מהתפתחות תהליכים אוטואימוניים לאחר השפעות זיהומיות ומדכאים את התגובה של הפיכת פרוטרומבין לתרומבין בדם. כאשר נוגדנים אלו מתגלים בדם על ידי הארכת בדיקות קרישה, הם מוגדרים כ"נוגד קרישה של לופוס".

תוצאה חיובית:

• גידולים;

גורם אנטי-גרעיני

גורם אנטי-גרעיניעל קו התא HEp-2 (ANF HEp-2, titers; ANA IF, titers). תוצאה חיובית של ANF נצפית ביותר מ-90% מהחולים עם SLE וצורות עור של מחלה זו, סקלרודרמה, מחלת רקמת חיבור מעורבת, תסמונת Sjögren. התוצאה של קביעת ה-ANF היא הטיטר, שהוא הערך של הדילול הסופי של הסרום, ששומר על הקרינה משמעותית של הליבה. ככל שהמכנה של השבר גבוה יותר, דילול הסרום גדול יותר, כך יש יותר נוגדנים בסרום של החולה. הרגישות של בדיקה זו ל-SLE היא 95%.

טיטר גבוה ANF (1/640 ומעלה):

• סבירות גבוהה למחלה ראומטית מערכתית;
• סיכון גבוה למחלת כבד אוטואימונית;
• עלייה בטיטרי ANF בדינמיקה מצביעה על החמרה של מחלה מערכתית;
• ב-SLE, הטיטר מתאם עם חומרת המחלה ויורד עם טיפול יעיל.

טיטר נמוך של ANF (עד 1/160):

• ב-1-2% מהאנשים הבריאים;
• אצל קרובי משפחה של חולים במחלות מערכתיות;
• מחלות אוטואימוניות, זיהומיות ואונקולוגיות רבות.

נוגדנים לנוקלאוזומים

נוגדנים נוקלאוזומים (NCA) הם בין הראשונים שנוצרו בגוף במהלך התפתחות SLE. טיטר NCA מתאם עם פעילות המחלה. הספציפיות של נוגדנים עצמיים אלה לאבחון של SLE היא יותר מ-95%.

פרשנות תוצאות הניתוח

תכולה גבוהה של נוגדנים לנוקלאוזומים (חיוביים):

• זאבת רפואית;
• SLE פעיל, מלווה בדלקת כליה.

• סבירות נמוכה ל-SLE;
• סיכון נמוך לנזק לכליות ב-SLE.

נוגדנים מקבוצת IgG ל-DNA דו-גדילי

הנוכחות של נוגדני IgG ל-DNA דו-גדילי (anti-dsDNA IgG; anti-dsDNA IgG) היא ספציפית ביותר ל-SLE, במידה פחותה במחלות רקמת חיבור מפוזרות אחרות או SLE המושרה על ידי תרופות. רגישות הבדיקה ל-SLE היא 85%. קביעה כמותית של נוגדני IgG anti-dsDNA מתאימה ביותר לניטור המצב, הפרוגנוזה והבקרה של הטיפול בחולי SLE, שכן היא מתאמת לפעילותו ולחומרת הגלומרולונפריטיס.

פענוח תוצאת הניתוח

מעלה רמה:

• זיהום הנגרם על ידי נגיף אפשטיין-בר;

רמה למטה:

• נוֹרמָה.

נוגדנים לקרדיוליפין IgG

נוגדני Anticardiolipin IgG (aCL IgG) הם אחד מסוגי נוגדני אנטי-פוספוליפידים אוטואימוניים המעורבים בפתוגנזה של תסמונת אנטי-פוספוליפיד. נוכחותם בדם מתבטאת בהארכת בדיקות קרישה תלויות פוספוליפיד (פרוטרומבין, APTT), המכונה "נוגד קרישה של לופוס".

פרשנות תוצאות הניתוח

• זאבת רפואית;
• צהבת סי;
• בורליוזיס;
• זיהום ב-HIV.

נוגדנים לקרדיוליפין IgM

נוגדנים ל-Cardiolipin IgM (aCL IgM), כאשר מתגלים, מצביעים על סיכון גבוה לפתח SLE; aCL IgM מתגלה ב-20-50% מהחולים עם זאבת אדמנתית מערכתית ו-3-20% מהחולים עם מחלות ראומטיות סיסטמיות אחרות.

פרשנות

חיובי (נוגדנים זוהו):

• צהבת סי;
• בורליוזיס;
• זיהום HIV;
• מחלות רקמת חיבור מערכתיות.

נורמות

אינדקס	נוֹרמָה
נוגד קרישה של לופוס (LA)	שלילי
גורם אנטי-גרעיני בקו התא HEp-2 (ANF HEp-2, טיטרים; ANA IF, טיטרים)	< 1:160
נוגדנים לנוקלאוזומים	< 20 отн. ед./мл
נוגדנים מקבוצת IgG ל-DNA דו-גדילי	< 20 МЕ/мл (отрицательно)
נוגדנים לקרדיוליפין IgG (aCL IgG)	שלילי או< 12 GPL-ед./мл
נוגדנים לקרדיוליפין IgM (aCL IgM)	< 12 MPL-ед./мл

ישנן מספר מחלות שבהן מערכת ההגנה לוקחת את תאי גופה כזרים, ולאחר מכן היא מתחילה לתקוף אותם בטעות. רוב המחלות האוטואימוניות הן צורה כרוניתומהווים איום רציני על הבריאות. על מנת לזהות מחלות אלו בצורה הטובה ביותר בשלב מוקדםהתפתחותם, הרופאים רושמים ניתוח של ה-ANF. קיצור זה מייצג "גורם אנטי-גרעיני". חלק מהדיווחים מתייגים את המחקר כ-ANA. המשמעות היא "ניתוח לנוגדנים אנטי-גרעיניים". ANF ​​הוא מדד משמעותי מבחינה קלינית המסייע לרופא ליצור את משטר הטיפול היעיל ביותר ולמנוע התפתחות של סיבוכים.

מהות השיטה

החומר הביולוגי למחקר הוא דם. עם כניסה לגופו של כל מְחוֹלֵל מַחֲלָההמערכת החיסונית מתחילה לייצר נוגדנים ספציפיים, שתפקידם להרוס אנטיגנים זרים. מהות השיטה היא לזהות ו קְבִיעַת כָּמוּתחומרים אלה ברקמת חיבור נוזלית.

הרופאים אומרים שבדיקת דם ANF היא בדיקת מעבדה שיש לה רמה גבוהה של תוכן מידע. בעזרתו, ניתן לזהות כל פתולוגיות אוטואימוניות אפילו בשלב מוקדם של התפתחותן.

נוגדנים ספציפיים מתגלים לעתים קרובות גם אצל אנשים הסובלים מדלקת כבד חמורה, סרטן ועוד מחלות מדבקות. חומרים אלו יכולים להימצא גם אצל אנשים בריאים. מצב זה דורש גישה משולבת לזיהוי הגורם.

ניתוח ANF כולל לפעמים הערכה של התוכן הכמותי של אימונוגלובולינים. נוכחותם עשויה להעיד על התפתחות קולגנוזיס ומחלות ראומטיות.

אינדיקציות

חשוב לדעת שבדיקת דם ANF היא מחקר שנקבע כדי לאשר או לשלול נוכחות של פתולוגיות אוטואימוניות, כמו גם להעריך את יעילות הטיפול.

רופא עשוי לחשוד במחלה על ידי התסמינים הבאים:

• מצב ממושך של חום ללא סיבות ברורות.
• כאבים במפרקים.
• דרגת עייפות מוגברת.
• כאבים בשרירים ובמפרקים.
• ביטויי עור ללא סיבות ברורות.
• פרקים תכופים של התכווצויות שרירים.
• טמפרטורת גוף מוגברת.
• ירידה במשקל הגוף.
• פרקים קבועים של בחילה.
• כְּאֵב רֹאשׁ.
• לקות שמיעה.
• שִׁלשׁוּל.

בנוסף, ניתוח ANF נקבע אם יש חשד למחלה ראומטית. המחקר מתבצע לאחר קבלת תוצאות אבחון מעבדה, שבהן האינדיקטורים של ESR, CEC וחלבון C-reactive מוגברים.

מה מראה

ניתוח ANF של דם מגלה פתולוגיות בעלות אופי אוטואימוני. המחקר הוא אינפורמטיבי ביחס למחלות הבאות:

• זאבת אדמנתית מערכתית.
• דלקת אנצפלומיאליטיס חריפה.
• מחלת סיוגרן.
• דלקת מפרקים שגרונית.
• התקרחות מוקדית.
• מחלת אדיסון.
• אנקילוזינג ספונדיליטיס.
• תסמונת אנטי-פוספוליפיד.
• אוטואימונית אנמיה המוליטית.
• פמפיגואיד שוורי.
• דלקת כבד אוטואימונית.
• מחלת צליאק.
• פתולוגיות אוטואימוניות אוזן פנימית.
• מחלת צ'אגס.
• תסמונת צ'ורג-שטראוס.
• מחלת ריאות חסימתית כרונית.
• דרמטומיוזיטיס.
• מחלת קרוהן.
• סוכרתאני מקליד.
• תסמונת Goodpasture.
• דלקת בלוטת התריס של השימוטו.
• מחלת גרייבס.
• תסמונת גילאן-בארה.
• מחלת קוואסאקי.
• הידראדניטיס מוגלתי.
• נפרופתיה ראשונית.
• פורפורה טרומבוציטופנית אידיופטית.
• דלקת שלפוחית ​​השתן אינטרסטיציאלית.
• זאבת אריתמטית.
• תסמונת שארפ.
• סקלרודרמה בצורת טבעת.
• טרשת נפוצה.
• נרקולפסיה.
• נוירומיוטוניה.
• פמפיגוס וולגריס.
• סַפַּחַת.
• תופעת ריינו.
• דלקת כלי דם.
• גרנולומטוזיס של וגנר.

זוהי רשימה חלקית של מחלות. חשוב שהניתוח של ANF יראה התפתחות של פתולוגיות אוטואימוניות בשלב המוקדם ביותר של מהלכן. זה מאפשר לרופא להחליט על טקטיקות הטיפול, ובעתיד להעריך את יעילותו.

הַדְרָכָה

דגימת חומר ביולוגי מתבצעת בבוקר. יש צורך לתרום דם על בטן ריקה. את הארוחה האחרונה יש לקחת לפחות 4 שעות לפני. יחד עם זאת, מותר לשתות מים בכל זמן ובכל כמות. השימוש באלכוהול אסור.

המנוחה מוצגת יום אחד לפני המחקר. מתח פיזי ופסיכו-רגשי מובילים לרוב לתוצאה שגויה. העישון אסור חצי שעה לפני תרומת דם.

יש צורך ליידע את הרופא לגבי התרופות שנלקחו בזמן רישום ניתוח ה-ANF. זאת בשל העובדה שהרכיבים הפעילים של חלק מהתרופות מעוררים ייצור של נוגדנים ויכולים גם לגרום לזאבת הנגרמת על ידי תרופות. תוצאות שליליות כוזבות הן לרוב תוצאה של נטילת גלוקוקורטיקוסטרואידים.

אם נקבעו למטופל פיזיותרפיה או בדיקות אינסטרומנטליות, יש לבצע אותן רק לאחר תרומת דם.

דגימת חומרים ביו

זה מתרחש בבוקר. החומר הביולוגי הוא דם ורידי. הדגימה שלו מתבצעת על פי האלגוריתם הסטנדרטי. ככלל, דם נלקח מוריד הממוקם על המרפק.

לאחר קבלת רקמת החיבור הנוזלית, יבודד ממנה סרום. זה מה שצריך בשביל הניתוח.

סוגי מחקרים ותיאורם

נכון לעכשיו, ניתן לזהות נוגדנים בחומר ביולוגי במספר דרכים:

1. שימוש במיקרוסקופ אימונופלואורסצנטי עקיף. אם קיימים חומרים ספציפיים בדם, הם יתחילו להיקשר לאנטיגנים גרעיניים ספציפיים. במעבדות משתמשים באלמנטים המסוגלים להאיר בספקטרום נפרד. לאחר מכן החומר הביולוגי נחקר בקפידה תחת מיקרוסקופ. ניתן לחשוד במחלה לפי סוג הזוהר. שיטה זו מוכרת כאינפורמטיבית ביותר ביחס לקביעת הערך של נוגדנים אנטי-גרעיניים. וריאציה אחת של הטכניקה היא מחקר באמצעות תאי HEp. ניתוח של ANF במקרה זה כולל דגימה של חומר ביולוגי מהגרון. התהליך אינו קשור להתרחשות של תחושות כואבות ותחושות לא נוחות אחרות. חשוב לדעת שבדיקת הדם ANF HEp-2 היא כיום הכי הרבה מחקר מדויק. תאי אפיתל מהגרון מודגרים בסרום, ולאחר מכן הם משולבים גם עם חומרים פלורסנטים.
2. בעזרת המהות שלה טמונה בעובדה שכאשר מתרחש הקשר בין נוגדנים ואנטיגנים, צבע התמיסה משתנה. נוכחות של גוון זה או אחר מאפשר לך לחשוד בנוכחות של פתולוגיה מסוימת.

הרופא המטפל צריך להתמודד עם הפרשנות של ניתוח ה-ANF. אם יש תוצאות חיוביות של הבדיקה, נקבעו בדיקות נוספות. האבחנה הסופית אינה נעשית על בסיס מסקנת ניתוח אחד.

ערכים תקינים

התוצאה הטובה ביותר היא כזו שבה נעדרים נוגדנים אנטי-גרעיניים. עם זאת, כדאי לזכור שניתן למצוא אותם גם אצל אנשים בריאים לחלוטין. במקרה זה יש לציין בדיקה חוזרת.

נורמת ניתוח ה-ANF היא טיטר של לא יותר מ-1:160. אינדיקטור זה רלוונטי הן למבוגרים והן לילדים.

בעת שעתקת בדיקת דם ANF, חשוב לקחת בחשבון את המידע הבא:

• טיטר נמוך אינם ערובה לכך שאין פתולוגיה בעלת אופי אוטואימוני. על פי הסטטיסטיקה, 5% מהחולים עם תוצאות המחקר הם שליליים.
• אם לאדם יש את כל הסימפטומים של מחלה אוטואימונית, והניתוח מצביע על אחרת, הרופא אינו שולל נוכחות של מחלה. במצבים כאלה, מבוצעת בנוסף בדיקת אנזים חיסונית.

ניתוח ANF המבוצע באמצעות תאי HEp-2 נחשב נורמלי אם הטיטר אינו גבוה מ-1:160. תוצאה של יותר מ-1:640 מצביעה על החמרה של פתולוגיות ראומטיות. במהלך תקופת ההפוגה של המחלה, הטיטר יורד ל-1:320. במקרה זה, רק רופא יוכל לזהות את העובדה, כפי שמעידה שיעור נמוך כל כך, בהתבסס על ההיסטוריה וה מאפיינים אישייםבריאותו של החולה.

ANF ​​הועלה

על ידי קשירה לאנטיגנים, הם יוצרים קומפלקס חיסוני. האחרון, בתורו, הוא הגורם ההתחלתי לפיתוח תהליך דלקתיבדפנות כלי הדם. כתוצאה מכך, הסימפטומים המדאיגים הראשונים של מחלות מערכתיות מופיעים באדם. הניתוח מראה טיטר גבוה.

במקרה זה, ניתן לזהות את הפתולוגיה על ידי קביעת סוג הזוהר. פרשנות התוצאות:

• הוֹמוֹגֵנִי. זוהר כזה עשוי להצביע על נוכחות של זאבת אדמנתית מערכתית, דלקת כבד כרונית וסקלרודרמה.
• שׁוּלִי. תמיד מדברים על פיתוח
• גַרגִירִי. מחלות אפשריות: תסמונת סיוגרן, זאבת אדמנתית מערכתית, דלקת מפרקים שגרונית, פתולוגיה של רקמת חיבור מעורבת.
• גרעיני. סוג זה של זוהר אופייני לזאבת אדמנתית מערכתית, פולימיוזיטיס, תסמונת סיוגרן וסקלרודרמה.
• צנטרומרי. פתולוגיות אפשריות: הסתיידות עור, תפקוד לקוי של הוושט, תסמונת Raynaud, telangiectasia, sclerodactyly.
• ציטופלזמה. זוהר כזה מעיד על מחלות כבד אוטואימוניות או פולימיוזיטיס.

ANF ​​שודרג לאחור

ירידה ברמת הנוגדנים האנטי-גרעיניים היא בעלת חשיבות קלינית רק בחיזוי ובניטור של מחלות מערכתיות קיימות ומזוהות בעבר.

אינדיקטור ANF תלוי ישירות בעוצמת התהליך הפתולוגי. בהקשר זה, הירידה שלו היא סימן חיובי, המעיד על כך שהטיפול הצליח, והמחלה נכנסה להפוגה.

יַחַס

כל פתולוגיה בעלת אופי אוטואימוני דורשת גישה טיפולית ספציפית. מטרת ביצוע בדיקת דם ל-ANF היא לזהות נוגדנים ברקמת החיבור הנוזלית ולהעריך את אופי האינטראקציה שלהם עם אנטיגנים ספציפיים. בהתבסס על תוצאות האבחון, הרופא יכול לבצע אבחנה ראשונית. יש צורך במחקר נוסף כדי לאשר זאת. ורק לאחר מכן הרופא מכין תוכנית טיפול. בְּחִירָה תרופותתלוי ישירות באיזו פתולוגיה מזוהה באדם.

מחיר

ניתן לבצע בדיקת ANF במעבדה עצמאית, במרפאה פרטית או במוסד רפואי ציבורי. חשוב לדעת שלא כל מרפאות התקציב מספקות שירות כזה. לגבי הזמינות שלו, עליך לבדוק עם הרישום.

הלימודים משולמים אפילו במוסדות רפואיים ציבוריים. עלות הניתוח תלויה ישירות במדיניות התמחור של המרפאה, המורכבת מגורמים רבים. המחיר המינימלי הוא 1000 רובל, המקסימום אינו עולה על 1700 רובל. בנוסף, אתה צריך לשלם תוספת עבור דגימת דם. העלות של שירות זה, ככלל, אינה עולה על 200 רובל.

סוף כל סוף

הקיצור ANF מייצג גורם אנטי-גרעיני. בדרך כלל, זה לא אמור להיות קיים בדם אדם בריאאו שהריכוז שלו צריך להיות פחות מ-1:160. ניתוח ל-ANF נקבע על מנת לזהות פתולוגיות בעלות אופי אוטואימוני בחולה בשלב המוקדם ביותר של התפתחותן.

מהות השיטה: כאשר חומרים מעוררים נכנסים לגוף, נוגדנים מתחילים להיווצר על ידי מערכת ההגנה. תפקידם לתקוף את האנטיגנים ולהרוס אותם. כדי לזהות תגובה זו בחולה, נלקח דם ורידי, ולאחר מכן הפרדת הסרום. לאחרונים מוסיפים אנטיגנים ספציפיים ותגובות נוספות מוערכות.

מערכת החיסון האנושית היא מנגנון ייחודי המתואם היטב המסוגל להגיב לכל החדרה חיצונית של גורמים פתוגניים, ובכך להגן על הגוף מפני מספר מחלות. אבל כידוע, לכל כלל יש יוצאים מן הכלל, ובמקרה הזה הם נראים כמו תגובה של מערכת החיסון לתאים שלה, מה שנקרא מחלות אוטואימוניות.

עם הפתולוגיות הללו, נוצרים נוגדנים שתוקפים תאים בריאים, פוגעים או משמידים אותם. כתוצאה מכך, יש הפרה של התפקוד של מבני רקמה בודדים ואפילו איברים. פתולוגיות כאלה, בשל שכיחותן ומעורבותן בתהליך של מספר איברים או מערכות, נקראות מחלות מערכתיות.

מתי שיטות מודרניותאבחון מעבדה, שאחת מהן היא בדיקת דם ANF לחיפוש גורם אנטי-גרעיני, המאפשרת לזהות נוגדנים אנטי-גרעיניים (אנטי-גרעיניים) ולקבוע את הגורם לפתולוגיה. אינדיקטור זה הוא אחד מהסממנים של מחלות רקמות חיבור מערכתיות (MCTD), המקובל כ"תקן הזהב" של מחקר מסוג זה.

מושגי יסוד המאפיינים את ה-WCTD

כפי שכבר תואר לעיל, הפתוגנזה של פתולוגיות אלה מקורה בכשלים תפקודיים. מערכת החיסון, ופיתוח של נוגדנים מגנים למרכיבים מסוימים של התאים שלהם. לתאים כאלה, בשל המוזרות של מקורם, יש שם שני - נוגדנים עצמיים. בתהליך של כשל חיסוני, הם באים במגע עם תרכובות חלבון גרעיני, חומצות גרעין ואנטיגנים של הציטופלזמה, מה שמוביל להופעת תסמינים. מחלות דלקתיות, כמו:

• שינויים מבניים ברקמות ובאיברים;
• עייפות בלתי סבירה בולטת;
• כאב בשרירים ובמפרקים;
• נזק לעור;
• ירידה במשקל ואחרים.

נוגדנים אנטי-גרעיניים (ANA) יכולים להיווצר במגוון רחב למדי של פתולוגיות אוטואימוניות, אך סביר להניח שהם יופיעו בזאבת אדמנתית מערכתית (SLE).

יש ליטול ANF אם יש סימנים לתהליך דלקתי ממושך

התייחסות! על פי הסטטיסטיקה, ליותר מ-90% מהחולים הסובלים מ-CTD יש ייצור לא תקין של נוגדנים כאלה. נכון לעכשיו, כ-200 ממינים שלהם נחקרו, שקיבלו שם כללי - הגורם האנטי-גרעיני. הם מיוצגים בעיקר על ידי אימונוגלובולינים מסוג G, אך לפעמים M או A נמצאים.

מהות בדיקת הדם לגורם אנטי-גרעיני

לפני שמתעמקים בפרטים של ביצוע מחקר על ANF, ראוי לציין שהטכניקה הומצאה והחלה בשימוש די מזמן - בשנות ה-60 של המאה הקודמת. אבל זה הפך נפוץ בפרקטיקה האבחונית רק בתחילת שנות ה -80 של המאה העשרים לאחר שיפור. עוד ב-1961, המדען בק השתמש בתאים של חיות מעבדה כמצע, ורק ב-1982 השתמש טאן בקו התא האנושי הרציף HEp-2 כדי לחפש ANF.

למרות שהמטרה העיקרית של השימוש בבדיקה זו היא לקבוע אבחנה של לופוס אריתמטוזוס, היא עדיין נחשבת לטכניקה אוניברסלית לקולגנוזות אחרות (MCTS). האחרונים כוללים:

• סקלרודרמה;
• דרמטומיוזיטיס;
• דלקת קרום העורקים הנודולרית;
• דלקת כבד פעילה כרונית וכו'.

אחת השיטות הנוחות ביותר, ולפיכך הנפוצות ביותר לקביעת הגורם האנטי-גרעיני בדם של חולים, היא אימונופלואורסצנטי עקיף. המחקר מתבצע על ידי מריחת סרום דם על תאים של קו אפיתליואיד מושתל של אדנוקרצינומה של הגרון האנושי HEp-2 (המכיל מספר מסוים של אנטיגנים גרעיניים) באמצעות מצומד מסומן (תרכובת) עם נוגדנים.

בחירה זו לא נעשתה במקרה - תאי HEp-2 הם מצע נוח מאוד לחקר החומר הביולוגי. יש להם גרעינים גדולים למדי, וכאשר הם נטועים על שקופיות מעבדה, הם גדלים בשכבה אחת. קווי תאים אנושיים אחרים יכולים לשמש גם כמצע, אבל מורפולוגיה וטיפוח מוצלחים בהחלט הופכים את HEp-2 לחומר הכרחי.

במהלך האבחון, כאשר הסרום של המטופל מודגרת עם מצע תאים, בנוכחות ANA, הם משולבים עם האנטיגנים הגרעיניים המתאימים. אתרי הקישור של ANF עם HEp-2 נקבעים באמצעות מצומד המסומן עם פלואורססאין (צבע). כדי להעריך את תוצאות התגובות שהתרחשו, נעשה שימוש במיקרוסקופ זוהר, המאפשר להבדיל בין אופי ודרגת הרצועות המתקבלות.

מיקרוסקופ פלורסנט למחקר מעבדה ANF

התייחסות! ל-HEp-2 האנושי, בניגוד לחתוך רקמות של בעלי חיים, יש קצב חלוקת תאים גבוה יותר, מה שמאפשר לזהות נוגדנים לאנטיגנים המתבטאים רק במהלך החלוקה. כמו כן, במצע האנושי אין מטריצה ​​תאית, מה שמפחית את איכות ההדמיה של הארה הנחקרת.

באילו קבוצות של אנטיגנים נעשה שימוש במחקר?

בעת פענוח חומרים, תמיד יש לקחת בחשבון שספקטרום ה-ANA כולל קבוצה גדולה למדי של נוגדנים עצמיים לנוקלאופרוטאין, ריבונוקלאופרוטאין, היסטונים, DNA ויחידות מבניות אחרות של הגרעין. מכאן נובע שפונקציונליות הבדיקה מכוונת לאיתור נוגדנים למרכיבי הגרעין והציטופלזמה, שזוהו במקור ב-SLE.

מאוחר יותר הורחבו יכולות האבחון של המחקר, עקב קביעת נוגדנים כאלה ב-CTDs אחרים. בשיטות סקר לאיתור ANA כולל, ככלל, נעשה שימוש בקבוצה מסוימת של אנטיגנים, הנלקחים כסמנים העיקריים של CTD אוטואימונית.

אלה כוללים נוגדנים מקבוצת IgG:

• SS-A (Ro) - ריבונוקלאופרוטאין גרעיני;
• SS-B (La) - חלבונים גרעיניים;
• Scl-70, חלבון-אנזים (טופואיזומראז-1);
• DNA דו-גדילי מקורי;
• RNP/Sm, קומפלקס של אנטיגנים;
• Jo-1, אנזים RNA synthetase;
• CENP-B (צנטרומר)
• תאי Hep-2;
• מיטוכונדריה (PDC).

AHA כמעט ואינו מזיק לגוף - הם אינם מסוגלים לחדור לרקמות חיות. אבל במקרים מסוימים, הם יכולים לשלב לתוך קומפלקסים אנטיגן נוגדנים, אשר כתוצאה מכך מוביל להרס מבני של רקמות. דוגמה אחת כזו היא נזק פרנכימי כלייתי ב-SLE. מאחר ומספר איברים מעורבים בתהליך ב-CTD, איתור ה-ANA אינו בעל חשיבות עליונה לאבחון, אלא נחשב רק אישור לתסמינים מסוימים.

יכולות ניתוח ANF, מבוטאות באחוזים

לומדים את התוצאות

אחרי הכל ההליכים הדרושים- נטילת החומר הביולוגי והכנתו המעבדתית למחקר, מתבצעת הערכה ופרשנות של התוצאות. זה כולל קביעת טיטר (ריכוז) של נוגדנים וסוג הזוהר. פרמטר משמעותי לאבחון הוא מדד ריכוז מעל 1:160. למשל, בזמן החמרה של שיגרון היא יכולה לעלות על 1:640, בעוד שבתקופת ההפוגה יש ירידה ל-1:160-1:320.

סוג הזוהר מציג מטרות ANA, שהיא נקודה קלינית חשובה במיוחד המנחה את הפעולות הבאות של הרופא במתן המרשם. אמצעי אבחון. לפי אופי הזוהר של הגרעינים בעת שימוש ב-HEp-2, יקבעו יותר מ-20 גרסאות של צביעה גרעינית, בהתאם לסוגי הנוגדנים הקיימים בחומר הביולוגי. העיקריים שבהם כוללים את סוגי הזוהר הבאים.

• שׁוּלִי. הזוהר מצביע על נוכחות של נוגדנים אנטי-DNA, מה שמאשר SLE. הסוגים העיקריים של אנטיגנים לסוג הפריפרי הם חלבוני היסטון ו-DNA.
• מפוזר (הומוגני). זוהר כזה נצפה ב-SLE, מלווה בפגיעה במבנה הכליות וב-CTD דומים, דלקת כליות, סקלרודרמה וכן SLE המושרה על ידי תרופות. אנטיגנים מסוג זה מיוצגים על ידי dsDNA, היסטונטים ונוקלאוזומים.
• גרעיני (גרעיני). סוג זה אופייני לצורה המערכתית של סקלרודרמה, ונקבע בנוכחות נוגדנים בחולים - RNA polymerase 1, PM/Scl, NOR, U3RNP.
• ציטופלזמה. סוג זה של הארה מצביע על נוכחות של סינתזות ANA ל-tRNA, כלומר Jo-1, והוא נצפה בפולימיוזיטיס.
• גַרגִירִי. נקבע בתסמונת סיוגרן, מחלת הנשיקה מדבקת, CTD מעורב (תסמונת שארפ, MCTD) ותסמונת לופוס הנגרמת על ידי תרופות. אנטיגנים הקיימים בעיקר עבור סוג זה הם SS-A, SS-B, Sm, U1-RNP ו-PCNA.
• גרגיר גדול. זה אופייני ל-CTD מעורב ולפי מדענים רבים, קשור לנוכחות האנטיגן RNP.
• גרגירי משובח. נקבעת נוכחותם של נוגדנים הנוצרים כנגד חלבונים ריבו-נוקלאיים - ASSP (ACCP), SS-A, SS-B ואחרים. נוגדנים כאלה אופייניים ל-SLE, כמו גם הספציפיים שלו צורות עור, דלקת מפרקים שגרונית, סקלרודרמה, פולימיוזיטיס, תסמונת סיוגרן.
• צנטרומרי. סוג זה נצפה בעיקר בסקלרודרמה. למרות שבדגימת דם אחת, במיוחד בנבדקים עם CTD מפוזר, ניתן לזהות נוגדנים לרכיבים גרעיניים שונים בפלזמה המופרדת.
• תכלילים נקודתיים בגרעין. סוג זה מתגלה בעיקר במחלות כבד אוטואימוניות. בעזרתו ניתן לשלב מספר סוגי פלורסנט, למשל גרעיני גרעיני ודק, הנובע מנוגדנים ל-Scl-70.

התייחסות! צוין כי עם עלייה בדילול של החומר הביולוגי בפלזמה, פרמטרי הזוהר עשויים להשתנות, שכן נוגדנים רבים מאופיינים בשינוי בפעילות בדרגות ריכוז שונות.

גורמים שיכולים להטות תוצאות

מהימנות הנתונים שהושגו במהלך המחקר יכולה להיות מושפעת רק מכמה גורמים שיכולים להראות גם תוצאה חיובית שגויה וגם תוצאה שלילית שגויה. לפיכך, תגובות בלתי סבירות לתזוזה כלפי מעלה נצפות בחולים קשישים מעל גיל 60 (על פי נתונים סטטיסטיים ב-10-37% מהמקרים) ובעת נטילת תרופות הגורמות לזאבת (אנטיביוטיקה מסויימת, אמצעי מניעה, סולפנאמידים, משתנים תיאזידים).

יצוין כי ב-5-55% מהנקבות עם שתלים בחזה, רמת ריכוז ה-AHA עולה. אבחנה שגויה עם תזוזה כלפי מטה יכולה להיגרם משימוש בתרופות גלוקוקורטיקואידיות - פרדניזולון, מטיפרד או דקסמתזון.

גורם אנטי-גרעיני

גורם אנטי-גרעיני- ניתוח מעבדה שמטרתו לקבוע סוגים שוניםאימונוגלובולינים ספציפיים למבנים של גרעין התא. מדד ה-ANF עולה במחלות מערכתיות של רקמת החיבור. הבדיקה מתבצעת לצורך אבחנתם, בידול, בקרת טיפול, איתור החמרות. זה נקבע לסימנים קליניים ומעבדתיים של זאבת אדמנתית מערכתית, סקלרודרמה, תסמונת שארפ, סיוגרן, דלקת מפרקים שגרונית, מיופתיה דלקתית. סרום הדם הוורידי נתון למחקר בשיטת RNIF. נוֹרמָלִי- טיטר לא גבוה מ-1:160. זמן הכנת נתוני הבדיקה הוא 8 ימי עבודה.

הבסיס למחלות ראומטיות הוא תגובה אוטואימונית כנגד מבני גרעין התא - קומפלקסים של חלבונים וחומצות גרעין. אנטיגנים נוצרים במהלך מוות מתוכנת של אפיתליוציטים ולימפוציטים. קרניים אולטרה סגולות, גורמים זיהומיים, תרופות מאיצות הרס תאים, מאטים את הסרת גופים אפופטוטיים ומעוררים התפתחות של תהליכים אוטואימוניים. נוגדנים למבנים של הגרעין מיוצגים על ידי סוגים רבים; בחקר הגורם האנטי-גרעיני, נבדלים כשמונה. היתרון של הבדיקה הוא בספציפיות הגבוהה שלה - מתגלים נוגדנים שלא ניתן לטהר ל-ELISA. עם זאת, חלק מהקומפלקסים החיסוניים מופק לפלסמה במהלך RNIF, כך שקיימת אפשרות לתוצאה שלילית כוזבת.

אינדיקציות

המחקר של הגורם האנטי-גרעיני מיועד לפתולוגיות מערכתיות של רקמת החיבור. הבסיס למינוי המבחן הם:

• תסמינים של מחלה ראומטית. ביטויים אופייניים הם חום, עייפות, חולשה, ירידה במשקל, כאבי שרירים ומפרקים, פריחות בעור. הבדיקה משמשת לאיתור והבחנה של SLE, סקלרודרמה, תסמונת סיוגרן, תסמונת שארפ, דלקת מפרקים שגרונית, מיופתיות דלקתיות.
• תוצאות בדיקות מעבדה. חשד לפתולוגיה ראומטית מתרחש עם עלייה ב-ESR, רמת חלבון C-reactive וה-CEC. הבדיקה מוזמנת לאשר את האבחנה.
• אבחון של מחלה ראומטית. הניתוח מתבצע מספר פעמים בשנה (התדירות נקבעת בנפרד) על מנת לעקוב אחר מהלך הפתולוגיה, לאחר קורס של שימוש בתרופות מדכאות חיסוניות - להערכת יעילות הטיפול.

הכנה לניתוח

חומר ביולוגי לקביעת גורם אנטי-גרעיני - דם ורידי. הליך האיסוף מתבצע בשעות הבוקר. כללי ההכנה הם כדלקמן:

1. את הארוחה האחרונה יש לקחת לא יאוחר מ-4 שעות לפני. שתיית מים מותרת בכל עת.
2. יש להוציא אלכוהול, פעילות גופנית, חוויות רגשיות יום לפני ההליך.
3. יש לדון עם הרופא על השימוש בתרופות. תרופות מסוימות מעוררות ייצור של נוגדנים, התפתחות של זאבת הנגרמת על ידי תרופות. על רקע נטילת גלוקוקורטיקוסטרואידים, ניתן לקבל נתונים שליליים כוזבים.
4. מוֹעִיל הליכי אבחון, יש לבצע פגישות פיזיותרפיה לאחר תרומת דם.
5. העישון אסור ב-30 הדקות האחרונות לפני ההליך.

במעבדה מבודדים סרום מהדם. קביעת נוגדנים אנטי-גרעיניים בו מתבצעת בשיטת RNIF באמצעות תרבית תאי HEp-2. הטיטר מוערך לפי הדילול הגבוה ביותר של החומר הביולוגי, שבו מתגלה הארה של מבנים גרעיניים, סוג האימונוגלובולינים - לפי אופי הקרינה. תנאי הניתוח הם 6-8 ימים.

ערכים תקינים

בדרך כלל, התוצאה של מחקר הגורם האנטי-גרעיני היא שלילית. הטיטר אינו גבוה מ-1:160 עבור מבוגרים וילדים. כאשר מפרשים את הערך הסופי, נלקחות בחשבון ההערות הבאות:

• טיטרים נמוכים של ANA מפחיתים את הסבירות לפתולוגיה אוטואימונית, אך אינם שוללים זאת. עם SLE, ב-5% מהמקרים התוצאה שלילית, מתבצעת בדיקת נוגדנים לאנטיגנים SS.
• השגת תוצאה תקינה לאחר קורס של טיפול מדכא חיסוני מאשרת את הצלחתה.
• תוצאה שלילית על רקע תסמינים של פתולוגיה אוטואימונית דורשת בדיקות נוספות (NCA, ANA by ELISA).

הגדלת המחוון

לנוגדנים אנטי-גרעיניים אין תכונות ציטוטוקסיות, אך לאחר התקשרותם לאנטיגנים נוצרים קומפלקסים חיסוניים המעוררים תהליכי דלקת בדפנות כלי הדם. הם מתבטאים בנגעים של העור, גלומרולי כליות, קרומי המפרקים, הצדר. מתפתחים תסמינים האופייניים לפתולוגיות מערכתיות. מחלות אפשריות נקבעות לפי סוג הזוהר עם דילול מינימלי של סרום:

• הוֹמוֹגֵנִי. פלואורסצנטי מפוזר מצביע על נוכחות של נוגדנים ל-ds DNA, היסטונים. נקבע ב-SLE ובזאבת הנגרמת על ידי תרופות.
• שׁוּלִי. סוג הזוהר נקבע על ידי מיקומו של הכרומטין; הוא מזוהה בנוכחות רכיבי Ig ל-DNA ספציפיים ל-SLE.
• גַרגִירִי. אנטיגנים הם קומפלקסים של נוקלאופרוטאין. הזוהר אינו ספציפי, נמצא במחלות ראומטיות רבות. טיטר גבוה וקרינה גדולה-גרגירית הם האופייניים ביותר לתסמונת שארפ.
• גַרעִינִי. משקף נוכחות של Ig ספציפי למבנים של הגרעין. מזהה סקלרודרמה ותסמונת סיוגרן. לעתים נדירות צוין באנדוקרינופתיות, פתולוגיות עור, השתלות איברים.
• צנטרומרי.אנטיגנים הם הצנטרומרים של הכרומוזומים. הזוהר מאשר סקלרודרמה מוגבלת.
• ציטופלזמה. מעורר על ידי נוכחות של נוגדנים ל-tRNA synthetase (Jo-1), ריבוזומים, אברונים. מאפשר לקבוע מיופתיות דלקתיות, נזק לכבד אוטואימוני.
• מיטוכונדריה.האנטיגנים הם מרכיבים של קומפלקס pyruvate decarboxylase. הזוהר אופייני לשחמת מרה ראשונית.
• מְנוּקָד. קשור למחזור של נוגדנים לנוקלאופרוטאין, הקשור לנזק אוטואימוני בכבד.

ירידה במדד

לירידה במדד יש ערך פרוגנוסטי בניטור מחלות מערכתיות של רקמת החיבור. רמת ANA קשורה לפעילות תהליכים פתולוגייםלכן, ירידה בריכוז שלהם היא סימן להפוגה, הצלחת הטיפול.