न्यूमोकोकस। निजी सूक्ष्म जीव विज्ञान। स्ट्रैपटोकोकस निमोनिया। न्यूमोकोकस की महामारी विज्ञान। न्यूमोकोकस की आकृति विज्ञान। मानव विकृति विज्ञान में न्यूमोकोकस न्यूमोकोकस जैविक गुणों की भूमिका के सांस्कृतिक गुण

जैव रासायनिक गुण जीनस के ज्यादातर विशिष्ट साल्मोनेला।विशिष्ट विशेषताएं हैं: एस टाइफी के किण्वन के दौरान गैस के गठन की अनुपस्थिति, एस। पैराटाइफी ए की हाइड्रोजन सल्फाइड और डीकार्बोक्सिलेट लाइसिन का उत्पादन करने में असमर्थता।

महामारी विज्ञान।टाइफाइड बुखार और पैराटाइफाइड बुखार एंथ्रोपोनोज हैं, यानी। मनुष्य में ही रोग उत्पन्न करते हैं। संक्रमण का स्रोत एक बीमार या बैक्टीरियोकैरियर है, जो मल, मूत्र, लार के साथ रोगज़नक़ को बाहरी वातावरण में छोड़ देता है। इन संक्रमणों के प्रेरक कारक, अन्य साल्मोनेला की तरह, बाहरी वातावरण में स्थिर होते हैं, मिट्टी और पानी में बने रहते हैं। एस टाइफी गैर-खेती योग्य हो सकती है। खाद्य उत्पाद (दूध, खट्टा क्रीम, पनीर, कीमा बनाया हुआ मांस, जेली) उनके प्रजनन के लिए अनुकूल वातावरण हैं। रोगज़नक़ का संचरण पानी द्वारा किया जाता है, जो वर्तमान में एक महत्वपूर्ण भूमिका निभाता है, साथ ही साथ आहार और संपर्क घरेलू मार्गों द्वारा भी। संक्रामक खुराक लगभग 1000 कोशिकाएं हैं। इन संक्रमणों के लिए मनुष्यों की प्राकृतिक संवेदनशीलता अधिक है।

रोगजनन और नैदानिक ​​​​तस्वीर। एक बार अंदर छोटी आंत, टाइफाइड और पैराटाइफाइड के रोगजनक श्लेष्म झिल्ली पर आक्रमण करते हैं जब

प्रभावकारी प्रोटीन TTSS-1, पीयर्स पैच में संक्रमण का प्राथमिक फोकस बनाते हैं। यह ध्यान दिया जाना चाहिए कि सबम्यूकोसा में आसमाटिक दबाव आंतों के लुमेन की तुलना में कम है। यह वी-एंटीजन के गहन संश्लेषण में योगदान देता है, जो रोगज़नक़ की एंटीफैगोसाइटिक गतिविधि को बढ़ाता है और सबम्यूकोसा की कोशिकाओं द्वारा प्रो-भड़काऊ ऊतक मध्यस्थों की रिहाई को दबा देता है। इसका परिणाम संक्रमण के प्रारंभिक चरणों में भड़काऊ दस्त के विकास और मैक्रोफेज में रोगाणुओं के गहन गुणन की अनुपस्थिति है, जिससे पीयर के पैच की सूजन और लिम्फैडेनाइटिस का विकास होता है, जिसके परिणामस्वरूप बाधा समारोह का उल्लंघन होता है। मेसेंटेरिक लसीकापर्वऔर साल्मोनेला का रक्त में प्रवेश, जिसके परिणामस्वरूप बैक्टरेमिया होता है। यह ऊष्मायन अवधि के अंत के साथ मेल खाता है, जो 10-14 दिनों तक रहता है। बैक्टीरिया के दौरान, जो पूरे ज्वर की अवधि के साथ होता है, टाइफाइड और पैराटाइफाइड के प्रेरक एजेंट पूरे शरीर में रक्त प्रवाह के साथ ले जाते हैं, पैरेन्काइमल अंगों के रेटिकुलोएन्डोथेलियल तत्वों में बस जाते हैं: यकृत, प्लीहा, फेफड़े, और अस्थि मज्जा में भी, जहां वे मैक्रोफेज में गुणा करते हैं। जिगर की कुफ़्फ़र कोशिकाओं से, साल्मोनेला पित्त नलिकाओं के माध्यम से, जिसमें वे फैलते हैं, पित्ताशय की थैली में प्रवेश करते हैं, जहाँ वे भी गुणा करते हैं। में जमा हो रहा है पित्ताशय, साल्मोनेला इसकी सूजन का कारण बनता है और पित्त प्रवाह के साथ छोटी आंत को पुन: संक्रमित करता है। पीयर के पैच में साल्मोनेला के पुन: परिचय से आर्थस घटना प्रकार, उनके परिगलन और अल्सरेशन के अनुसार उनमें हाइपरर्जिक सूजन का विकास होता है, जिससे हो सकता है आंतों से खून बहनाऔर आंतों की दीवार का छिद्र। टाइफाइड और पैराटाइफाइड रोगजनकों की फागोसाइटिक कोशिकाओं में बने रहने और बाद की कार्यात्मक अपर्याप्तता के साथ गुणा करने की क्षमता एक बैक्टीरियोकैरियर के गठन की ओर ले जाती है। साल्मोनेला भी पित्ताशय की थैली में लंबे समय तक रह सकता है, मल में लंबे समय तक उत्सर्जित हो सकता है और पर्यावरण को दूषित कर सकता है। रोग के दूसरे सप्ताह के अंत तक, शरीर से मूत्र, पसीने और माँ के दूध के साथ रोगज़नक़ बाहर निकलने लगता है। डायरिया रोग के दूसरे या तीसरे सप्ताह की शुरुआत के अंत में शुरू होता है, उस समय से रोगजनकों को मल से बोया जाता है।

न्यूमोकोकी का वर्णन सबसे पहले आर. कोच (1871) ने किया था।

आकृति विज्ञान. न्यूमोकोकी डिप्लोकॉसी होते हैं जिसमें एक दूसरे का सामना करने वाली कोशिकाओं के किनारे चपटे होते हैं और विपरीत भुजाएं लम्बी होती हैं, इसलिए उनके पास एक मोमबत्ती की लौ जैसा लांसोलेट आकार होता है (चित्र 4 देखें)। न्यूमोकोकी का आकार 0.75-0.5 × 0.5-1 माइक्रोन है, वे जोड़े में व्यवस्थित होते हैं। तरल पोषक माध्यम में, वे अक्सर स्ट्रेप्टोकोकी जैसी छोटी श्रृंखला बनाते हैं। Prevmococci गतिहीन होते हैं, इनमें बीजाणु नहीं होते हैं, शरीर में एक कैप्सूल बनाते हैं जो दोनों कोक्सी को घेरे रहते हैं। कैप्सूल में एक गर्मी प्रतिरोधी पदार्थ एंटीफैगिन होता है (जो न्यूमोकोकस को फागोसाइटोसिस और एंटीबॉडी की क्रिया से बचाता है)। कृत्रिम पोषक माध्यम पर बढ़ने पर, न्यूमोकोकी अपना कैप्सूल खो देता है। न्यूमोकोकी ग्राम पॉजिटिव हैं। पुरानी संस्कृतियों में ग्राम-नकारात्मक बैक्टीरिया पाए जाते हैं।

खेती करना. न्यूमोकोकी ऐच्छिक अवायवीय हैं। 36-37 डिग्री सेल्सियस के तापमान और 7.2-7.4 के पीएच पर बढ़ो । वे मीडिया पर मांग कर रहे हैं, क्योंकि वे कई अमीनो एसिड को संश्लेषित नहीं कर सकते हैं, इसलिए वे केवल देशी प्रोटीन (रक्त या सीरम) के अतिरिक्त मीडिया पर बढ़ते हैं। सीरम के साथ अगर पर छोटी, नाजुक, काफी पारदर्शी कॉलोनियां बनती हैं। रक्त के साथ अग्र पर, हरे-भूरे क्षेत्र से घिरी नम हरी-भूरी कॉलोनियां बढ़ती हैं, जो हीमोग्लोबिन के मेथेमोग्लोबिन में रूपांतरण का परिणाम है। न्यूमोकोकी 0.2% ग्लूकोज के साथ शोरबा में और मट्ठा के साथ शोरबा में अच्छी तरह से विकसित होता है। तरल माध्यम में वृद्धि को फैलाना मैलापन और तल पर धूल भरी तलछट की विशेषता है।

एंजाइमी गुण. न्यूमोकोकी में काफी स्पष्ट saccharolytic गतिविधि है। वे टूट जाते हैं: एसिड के निर्माण के साथ लैक्टोज, ग्लूकोज, सुक्रोज, माल्टोज, इनुलिन। मैनिटोल को किण्वित न करें। उनके प्रोटियोलिटिक गुण खराब रूप से व्यक्त किए जाते हैं: वे दूध को जमाते हैं, जिलेटिन को द्रवीभूत नहीं करते हैं, और इंडोल नहीं बनाते हैं। न्यूमोकोकी पित्त में घुल जाता है। इनुलिन का टूटना और पित्त में घुलना महत्वपूर्ण है नैदानिक ​​संकेतस्ट्रेप्टोकोकस न्यूमोनिया को स्ट्रेप्टोकोकस पाइोजेन्स से अलग करना।

रोगजनकता कारक. न्यूमोकोकी हाइलूरोनिडेस, फाइब्रिनोलिसिन आदि का उत्पादन करता है।

विष निर्माण. न्यूमोकोकी एंडोटॉक्सिन, हेमोलिसिन, ल्यूकोसिडिन का उत्पादन करता है। न्यूमोकोकी का विषाणु कैप्सूल में एंटीफैगिन की उपस्थिति से भी जुड़ा है।

एंटीजेनिक संरचना और वर्गीकरण. न्यूमोकोकी के साइटोप्लाज्म में एक प्रोटीन एंटीजन होता है जो पूरे समूह के लिए सामान्य होता है, और कैप्सूल में एक पॉलीसेकेराइड एंटीजन होता है। पॉलीसेकेराइड एंटीजन के अनुसार, सभी न्यूमोकोकी को 84 सेरोवर में विभाजित किया जाता है। सेरोवर I, II, III मनुष्यों के लिए सबसे आम रोगजनक हैं।

न्यूमोकोकी अस्थिर सूक्ष्मजीवों के समूह से संबंधित है। 60 डिग्री सेल्सियस का तापमान उन्हें 3-5 मिनट में नष्ट कर देता है। वे कम तापमान और सुखाने के लिए काफी प्रतिरोधी हैं। सूखे थूक में, वे 2 महीने तक व्यवहार्य रहते हैं। पोषक माध्यम पर, वे 5-6 दिनों से अधिक नहीं रहते हैं। इसलिए, खेती करते समय, हर 2-3 दिनों में पुनर्बीमा करना आवश्यक है। कीटाणुनाशक के पारंपरिक समाधान: 3% फिनोल, 1:1000 के कमजोर पड़ने पर उन्हें कुछ ही मिनटों में नष्ट कर देते हैं।

न्यूमोकोकी ऑप्टोचिन के प्रति विशेष रूप से संवेदनशील होते हैं, जो उन्हें 1:100,000 के कमजोर पड़ने पर मार देता है।

पशु संवेदनशीलता. मनुष्य न्यूमोकोकी का प्राकृतिक मेजबान है। हालांकि, न्यूमोकोकी बछड़ों, मेमनों, सूअरों, कुत्तों और बंदरों में बीमारी का कारण बन सकता है। प्रायोगिक जानवरों में से, सफेद चूहे न्यूमोकोकस के प्रति अत्यधिक संवेदनशील होते हैं।

संक्रमण के स्रोत

संचरण मार्ग. एयरबोर्न, एयरबोर्न हो सकता है।

प्रवेश द्वार. ऊपरी की श्लेष्मा झिल्ली श्वसन तंत्र, आँख और कान।

मनुष्यों में रोग. न्यूमोकोकी विभिन्न स्थानीयकरण के पायोइन्फ्लेमेटरी रोगों का कारण बन सकता है। न्यूमोकोकी के लिए विशिष्ट हैं:

1) लोबार निमोनिया; 2) कॉर्निया का रेंगना अल्सर;

सबसे आम बीमारी क्रुपस निमोनिया है, जो फेफड़ों के एक, कम अक्सर दो या तीन पालियों को प्रभावित करता है। रोग तीव्र है, तेज बुखार, खांसी के साथ। यह आमतौर पर गंभीर रूप से समाप्त होता है।

रोग प्रतिरोधक क्षमता. बीमारी के बाद, अस्थिर प्रतिरक्षा बनी रहती है, क्योंकि निमोनिया को रिलैप्स की विशेषता होती है।

निवारण. यह स्वच्छता और निवारक उपायों के लिए नीचे आता है। विशिष्ट प्रोफिलैक्सिस विकसित नहीं किया गया है।

इलाज. एंटीबायोटिक्स का उपयोग किया जाता है - पेनिसिलिन, टेट्रासाइक्लिन, आदि।

परीक्षण प्रश्न 1. न्यूमोकोकी की आकृति विज्ञान। खेती और एंजाइमेटिक गुण।

2. कौन से कारक न्यूमोकोकी की रोगजनकता निर्धारित करते हैं और क्या न्यूमोकोकी को फागोसाइटोसिस से बचाता है?

3. न्यूमोकोकल संक्रमण के मुख्य द्वार क्या हैं। न्यूमोकोकी से कौन-कौन से रोग होते हैं?

सूक्ष्मजीवविज्ञानी अनुसंधान

अध्ययन का उद्देश्य: न्यूमोकोकस का पता लगाना।

शोध सामग्री

1. कफ (निमोनिया)।

2. ग्रसनी (टॉन्सिलिटिस) से बलगम।

3. अल्सर से मुक्ति (कॉर्निया का रेंगना अल्सर)।

4. कान से स्राव (ओटिटिस मीडिया)।

5. मवाद (फोड़ा)।

6. फुफ्फुस पंचर (फुफ्फुसशोथ)।

7. रक्त (संदिग्ध सेप्सिस)।

सामग्री संग्रह के तरीके

सामग्री संग्रह के तरीके

1 (सुबह के थूक को लेना बेहतर होता है (विशिष्ट निमोनिया के साथ, थूक में जंग का रंग होता है)।)

बुनियादी शोध विधियां

1. सूक्ष्म।

2. सूक्ष्मजीवविज्ञानी।

3. जैविक।

अनुसंधान प्रगति

शोध का पहला दिन

शोध का पहला दिन

जैविक नमूना. एक बाँझ शोरबा में थोड़ा (3-5 मिलीलीटर थूक) पायसीकृत किया जाता है, इस मिश्रण के 0.5 मिलीलीटर को एक सफेद माउस में अंतःक्षिप्त रूप से इंजेक्ट किया जाता है। 6-8 घंटों के बाद, चूहे रोग के लक्षण दिखाते हैं। इस समय, एक्सयूडेट में पहले से ही न्यूमोकोकस का पता लगाया जा सकता है। पेट की गुहा. एक्सयूडेट को एक बाँझ सिरिंज के साथ लिया जाता है। इससे स्मीयर बनाए जाते हैं, ग्राम के अनुसार दागे जाते हैं और सूक्ष्मदर्शी किए जाते हैं। एक शुद्ध संस्कृति को अलग करने के लिए, एक्सयूडेट को सीरम के साथ अगर पर टीका लगाया जाता है। यदि माउस मर जाता है या बीमार हो जाता है, तो शुद्ध संस्कृति को अलग करने के लिए सीरम अगर पर हृदय से रक्त को सुसंस्कृत किया जाता है। फसलों को थर्मोस्टेट में रखा जाता है।

न्यूमोकोकस के प्रकार को निर्धारित करने के लिए एक त्वरित विधि(माइक्रोएग्लूटीनेशन की प्रतिक्रिया)। एक संक्रमित माउस के उदर गुहा से एक्सयूडेट की 4 बूंदों को कांच की स्लाइड पर लगाया जाता है। टाइप I एग्लूटीनेटिंग सीरम को पहली बूंद में, टाइप II सीरम को दूसरे में, टाइप III को तीसरे में, और आइसोटोनिक सोडियम क्लोराइड सॉल्यूशन (कंट्रोल) को चौथे में मिलाया जाता है।

टाइप I और II सीरा 1:10 के अनुपात में पहले से पतला होता है, और टाइप III सीरम - 1:5। सभी बूंदों को पतला मैजेंटा के साथ उभारा, सुखाया, स्थिर और दाग दिया जाता है। बूंदों में से एक में सकारात्मक परिणाम के साथ, माइक्रोबियल एकत्रीकरण (एग्लूटिनेशन) नोट किया जाता है।

शोध का दूसरा दिन

संस्कृतियों को थर्मोस्टेट से हटा दिया जाता है, जांच की जाती है, और संदिग्ध कॉलोनियों से स्मीयर बनाए जाते हैं। स्मीयरों में ग्राम-पॉजिटिव लैंसोलेट डिप्लोकॉसी की उपस्थिति में, शुद्ध संस्कृति प्राप्त करने के लिए 2-3 कॉलोनियों को सीरम के साथ अगर की एक तिरछी रेखा पर अलग किया जाता है। फसलों को थर्मोस्टेट में रखा जाता है। स्मीयर शोरबा, ग्राम-दाग, और सूक्ष्मदर्शी से बने होते हैं।

अध्ययन के तीसरे दिन थर्मोस्टेट से फसलों को हटा दिया जाता है। कल्चर की शुद्धता की जांच करें - स्मीयर, ग्राम स्टेन और माइक्रोस्कोप बनाएं। यदि ग्राम-पॉजिटिव लैंसोलेट डिप्लोकॉसी पृथक संस्कृति में मौजूद हैं, तो पृथक संस्कृति की पहचान टीकाकरण द्वारा की जाती है:

1) हिस मीडिया (लैक्टोज, ग्लूकोज, सुक्रोज, माल्टोज) पर, बुवाई सामान्य तरीके से की जाती है - माध्यम में इंजेक्शन द्वारा;

2) माध्यम पर inulin के साथ; 3) ऑप्टोचिन के साथ माध्यम पर;

4) पित्त के साथ एक नमूना डालें।

इंसुलिन परीक्षण. अध्ययनित कल्चर को इनुलिन और लिटमस टिंचर युक्त पोषक माध्यम पर बोया जाता है, और थर्मोस्टेट में रखा जाता है। 1824 घंटे के बाद, फसलों को थर्मोस्टेट से हटा दिया जाता है। न्यूमोकोकी की उपस्थिति में, माध्यम लाल हो जाता है (स्ट्रेप्टोकोकी माध्यम की स्थिरता और रंग नहीं बदलता है)।

ऑप्टोचिन के प्रति संवेदनशीलता का निर्धारण. आइसोलेटेड कल्चर को ऑप्टोचिन 1:50,000 युक्त 10% ब्लड एगर पर बोया जाता है। न्यूमोकोकी, स्ट्रेप्टोकोकी के विपरीत, ऑप्टोचिन युक्त मीडिया पर नहीं बढ़ता है।

पित्त परीक्षण. अध्ययन किए गए शोरबा संस्कृति के 1 मिलीलीटर को एग्लूटिनेशन ट्यूबों में डाला जाता है। उनमें से एक में खरगोश के पित्त की एक बूंद डाली जाती है, दूसरी परखनली नियंत्रण का काम करती है। दोनों परखनलियों को थर्मोस्टेट में रखा गया है। 18-24 घंटों के बाद, न्यूमोकोकी का लसीका होता है, जो एक बादल शोरबा के समाशोधन में व्यक्त किया जाता है। नियंत्रण में, निलंबन बादल छाए रहते हैं।

पित्त के साथ एक नमूना घने पोषक माध्यम पर रखा जा सकता है। ऐसा करने के लिए, सूखे पित्त का एक दाना अगर और सीरम प्लेटों में उगाए गए न्यूमोकोकी की एक कॉलोनी पर लगाया जाता है - कॉलोनी घुल जाती है - गायब हो जाती है।

अध्ययन के चौथे दिन परिणाम रिकॉर्ड करें (तालिका 26)।

तालिका 26. विषाणुजनित स्ट्रेप्टोकोकस से न्यूमोकोकस का विभेदन

टिप्पणी। करने के लिए - एसिड के गठन के साथ कार्बोहाइड्रेट का टूटना।

वर्तमान में, स्ट्रेप्टोकोकल एंटीबॉडी को निर्धारित करने के लिए सीरोलॉजिकल अनुसंधान विधियों (आरएसके और आरआईजीए) का व्यापक रूप से उपयोग किया जाता है। फ्लोरोसेंट एंटीबॉडी का उपयोग करके पृथक संस्कृति के समूह और सेरोवर का निर्धारण किया जाता है।

न्यूमोकोकल विषाणु का निर्धारण. न्यूमोकोकस की दैनिक शोरबा संस्कृति को 10 -2 से 10 -8 तक 1% पेप्टोन पानी से पतला किया जाता है, प्रत्येक कमजोर पड़ने का 0.5 मिलीलीटर दो सफेद चूहों को दिया जाता है। 10 -7 के तनुकरण में चूहों की मृत्यु का कारण बनने वाली संस्कृति को 10 -4 -10 के तनुकरण में विषाणु के रूप में आंका जाता है -

6 को मध्यम रूप से विषैला माना जाता है। वह संस्कृति जिसने चूहों की मृत्यु का कारण नहीं बनाया, वह विषैला है।

परीक्षण प्रश्न

1. आप न्यूमोकोकी की एक शुद्ध संस्कृति को अलग करने के कौन से तरीके जानते हैं?

2. कौन सा जानवर न्यूमोकोकस के लिए अतिसंवेदनशील है?

3. संक्रमित माउस के एक्सयूडेट के साथ क्या प्रतिक्रिया होती है और किस उद्देश्य से?

4. पाइोजेनिक कोक्सी के किन प्रतिनिधियों से न्यूमोकोकस को अलग किया जाना चाहिए और किस परीक्षण द्वारा?

5. न्यूमोकोकी के विषाणु का निर्धारण कैसे करें? व्यायाम

एक थूक परीक्षा योजना तैयार करें, जो दिन के अनुसार इसके चरणों को दर्शाती है।

पोषक मीडिया

सीरम अगर(अध्याय 7 देखें)।

मट्ठा शोरबा(अध्याय 7 देखें)।

खून के साथ अगर(अध्याय 7 देखें)।

हिस मीडिया(सूखा)।

इंसुलिन परीक्षण माध्यम. आसुत जल के 200 मिलीलीटर में 10 मिलीलीटर निष्क्रिय गोजातीय सीरम, 18 मिलीलीटर लिटमस टिंचर और 3 ग्राम इनुलिन मिलाएं। लगातार 3 दिनों के लिए 100 डिग्री सेल्सियस पर बहने वाली भाप के साथ जीवाणुरहित करें। पित्त शोरबा (अध्याय 7 देखें)।

अध्याय 16

जीनस नीसेरिया में मनुष्यों के लिए रोगजनक दो प्रकार के रोगाणु शामिल हैं: एन। मेनिंगिटिडिस और एन। गोनोरिया। निसेरिया मेनिंगिटिडिस को वेक्सेलबाम (1887) द्वारा एक रोगी के मस्तिष्कमेरु द्रव से अलग किया गया था।

आकृति विज्ञान. मेनिंगोकोकी युग्मित कोक्सी होते हैं, जिसमें दो बीन के आकार के कोक्सी होते हैं, जो एक दूसरे से अवतल पक्षों के साथ स्थित होते हैं, उनकी बाहरी दीवारें उत्तल होती हैं (चित्र 4 देखें)। प्रत्येक कोकस का आकार 0.6-0.8 × 1.2-1.5 माइक्रोन है। वे बहुरूपी हैं। मेनिंगोकोकी गैर-प्रेरक होते हैं, बीजाणु नहीं होते हैं, एक कैप्सूल बनाते हैं। ग्राम-नकारात्मक। शुद्ध संस्कृतियों में, वे टेट्राड में और किसी विशेष क्रम में व्यक्तिगत कोक्सी के रूप में स्थित होते हैं, और मस्तिष्कमेरु द्रव से तैयार किए गए स्मीयर में, वे अक्सर जोड़े में व्यवस्थित होते हैं। प्युलुलेंट सामग्री में, वे ल्यूकोसाइट के अंदर स्थित होते हैं।

खेती करना. मेनिंगोकोकी एरोबेस हैं। वे पोषक मीडिया पर मांग कर रहे हैं, केवल देशी प्रोटीन (सीरम, रक्त) वाले मीडिया पर गुणा करें। 36-37 डिग्री सेल्सियस के तापमान पर बढ़ो (विकास 25 डिग्री सेल्सियस पर रुक जाता है), पीएच 7.4-7.6। उनके प्रजनन के लिए एक नम वातावरण और कार्बन डाइऑक्साइड की बढ़ी हुई मात्रा (एक कारक जो उनके विकास को उत्तेजित करता है) की आवश्यकता होती है। बुवाई ताजे तैयार माध्यम में करनी चाहिए।

घने पोषक माध्यम पर, मेनिंगोकोकी छोटे, 2-3 मिमी व्यास, कोमल, पारभासी, नीले, चिपचिपे कालोनियों का निर्माण करते हैं। सीरम के साथ शोरबा में, मेनिंगोकोकी थोड़ा मैलापन और एक छोटा सा अवक्षेप देता है। एस-फॉर्म में ताजा पृथक उपभेदों। पुरानी संस्कृतियां अलग हो सकती हैं, जो किसी न किसी आर-आकार की कॉलोनियों का निर्माण करती हैं।

एंजाइमी गुण. जैव रासायनिक रूप से, मेनिंगोकोकी बहुत सक्रिय नहीं हैं। वे अम्ल बनाने के लिए ग्लूकोज और माल्टोज को तोड़ते हैं। उनके प्रोटियोलिटिक गुण व्यक्त नहीं किए जाते हैं (वे दूध को दही नहीं बनाते हैं, जिलेटिन को पतला नहीं करते हैं)।

मेनिंगोकोकी की रोगजनकता एक कैप्सूल की उपस्थिति के कारण होती है जो फागोसाइटोसिस, पिली को रोकता है जो उपकला कोशिकाओं की सतह पर सूक्ष्म जीव के लगाव को बढ़ावा देता है, और एंजाइमों का गठन: हाइलूरोनिडेस और न्यूरोमिनिडेस।

विष निर्माण. जब जीवाणु कोशिकाएं नष्ट हो जाती हैं, तो एक मजबूत गर्मी प्रतिरोधी एंडोटॉक्सिन निकलता है, जो कोशिका भित्ति का एक लिपोपॉलेसेकेराइड है। रोग में यह रक्त में तथा रोगियों के मस्तिष्कमेरु द्रव में पाया जाता है। रोग की गंभीरता अक्सर संचित विष की मात्रा पर निर्भर करती है।

एंटीजेनिक संरचना. पॉलीसेकेराइड (कैप्सुलर) एंटीजन के अनुसार, मेनिंगोकोकी को सेरोग्रुप में विभाजित किया जाता है: ए, बी, सी, डी, एक्स, वाई यू-135 29 ई (कुल नौ सेरोग्रुप)।

के अनुसार अंतर्राष्ट्रीय वर्गीकरणमुख्य समूह ए, बी और सी हैं। समूह ए मेनिंगोकोकी अक्सर सामान्यीकृत प्रक्रियाओं का कारण बनता है और सबसे बड़ा महामारी विज्ञान महत्व का होता है। समूह बी और सी मेनिंगोकोकी छिटपुट रोग का कारण बनते हैं। शेष सेरोग्रुप का बहुत कम अध्ययन किया गया है।

कारकों के लिए लचीलापन वातावरण . मेनिंगोकोकी अस्थिर हैं। 70 डिग्री सेल्सियस का तापमान उन्हें 2-3 मिनट, 55 डिग्री सेल्सियस - 5 मिनट के बाद नष्ट कर देता है। इस समूह के अन्य कोक्सी के विपरीत, वे बर्दाश्त नहीं करते हैं हल्का तापमानतापमान में उतार-चढ़ाव के प्रति विशेष रूप से संवेदनशील हैं।

कीटाणुनाशक समाधानों की साधारण सांद्रता उन्हें जल्दी से नष्ट कर देती है।

पशु संवेदनशीलता. प्राकृतिक परिस्थितियों में, जानवर मेनिंगोकोकी के प्रति संवेदनशील नहीं होते हैं। लेकिन जब मेनिंगोकोकी को बंदरों में सूक्ष्म रूप से इंजेक्ट किया जाता है, तो वे बीमार हो सकते हैं।

इंट्रापेरिटोनियल संक्रमण गिनी सूअरऔर सफेद चूहे एंडोटॉक्सिन की क्रिया के कारण अपनी मृत्यु का कारण बनते हैं।

संक्रमण के स्रोत. एक बीमार व्यक्ति और एक जीवाणु वाहक।

संचरण मार्ग. मुख्य मार्ग हवाई है।

मनुष्यों में रोग:

1) नासोफेरींजिटिस;

2) मेनिंगोकोसेमिया;

3) सेरेब्रोस्पाइनल महामारी मैनिंजाइटिस।

रोगजनन. एक बार नासॉफिरिन्क्स के श्लेष्म झिल्ली पर, मेनिंगोकोकी को वहां स्थानीयकृत किया जा सकता है, जिससे कैरिज हो सकता है या तीव्र नासॉफिरिन्जाइटिस हो सकता है। यदि वे लसीका वाहिकाओं में प्रवेश करते हैं, रक्त और सामान्यीकरण करते हैं, तो वे एंडोटॉक्सिन की क्रिया के कारण पैरेन्काइमल अंगों में गहरा परिवर्तन करते हैं। मेनिंगोकोसेमिया विकसित होता है। मेनिंगोकोकी के मेनिन्जेस में प्रवेश के साथ, प्युलुलेंट सूजन होती है - मेनिन्जाइटिस। मेनिंगोकोकल मेनिन्जाइटिस के लिए मस्तिष्कमेरु द्रवबादल छाए रहेंगे (तपेदिक मैनिंजाइटिस के विपरीत)। काठ का पंचर के दौरान, इंट्राक्रैनील दबाव बढ़ने के कारण जेट में द्रव बह जाता है। मेनिन्जियल घटना में सिरदर्द, गर्दन में अकड़न, उल्टी आदि की विशेषता होती है। मेनिनजाइटिस बच्चों में अधिक आम है। वयस्कों में, संक्रमण अक्सर कैरिज या नासॉफिरिन्जाइटिस तक सीमित होता है।

रोग प्रतिरोधक क्षमता. संक्रमण के बाद की प्रतिरक्षा तनावपूर्ण होती है, यह ऑप्सोनिन, पूरक-फिक्सिंग और जीवाणुनाशक एंटीबॉडी के कारण होती है। रोग का कोर्स पॉलीसेकेराइड और प्रोटीन एंटीजन के लिए एंटीबॉडी के गठन की तीव्रता पर निर्भर करता है।

निवारण. यह वाहकों का शीघ्र पता लगाने, नासॉफिरिन्जाइटिस के रोगियों के अलगाव के लिए नीचे आता है। मरीजों को अस्पताल में भर्ती कराया जाता है।

विशिष्ट प्रोफिलैक्सिस. एक रासायनिक टीका विकसित किया गया है, जिसमें सेरोग्रुप ए और सी के पॉलीसेकेराइड शामिल हैं। इम्युनोग्लोबुलिन का उपयोग आपातकालीन प्रोफिलैक्सिस के लिए किया जाता है।

इलाज. जीवाणुरोधी दवाएं- पेनिसिलिन, क्लोरैम्फेनिकॉल, एम्पीसिलीन।

परीक्षण प्रश्न

1. मेनिंगोकोकी के रूपात्मक गुण क्या हैं?

2. मेनिंगोकोकी किस माध्यम में उगाए जाते हैं और उनके प्रजनन के लिए कौन सी परिस्थितियाँ आवश्यक हैं?

3. मेनिंगोकोकी की जैव रासायनिक गतिविधि और बाहरी वातावरण में उनका प्रतिरोध क्या है?

4. मेनिंगोकोकी से कौन-कौन से रोग होते हैं?

5. मेनिंगोकोकी को किस प्रतिजन द्वारा सेरोग्रुप में विभाजित किया जाता है?

वर्गीकरण- एक पदानुक्रमित योजना में जीवों के वितरण (वर्गीकरण) के सिद्धांतों और विधियों का विज्ञान।

उच्च कर आवंटित करें- राज्य, विभाग, वर्ग, व्यवस्था, परिवार, जनजाति, जीनस, प्रजाति। जीव विज्ञान में मूल वर्गीकरण इकाई प्रजाति है।

राय – यह सूक्ष्मजीवों का एक क्रमिक रूप से स्थापित सेट है जिसका एक ही मूल, एक समान जीनोटाइप और निकटतम संभव फेनोटाइपिक विशेषताएं और गुण हैं.

सिस्टमैटिक्स के सिद्धांत:

क्ष फाइलोजेनेटिक (बड़े कर के लिए)।

क्यू फेनोटाइपिक। यह उपयोगकर्ता है:

§ टिंक्टोरियल गुण- विभिन्न रंगों से दागने की क्षमता।

§ सांस्कृतिक गुण- तरल और ठोस पोषक माध्यम पर जीवाणु वृद्धि की विशेषताएं।

§ गतिशीलता

§ sporulation- कोशिका में बीजाणुओं के स्थान की आकृति और प्रकृति।

§ शारीरिक गुण- खाने की किस्म; श्वास का प्रकार।

§ जैव रासायनिक गुण- विभिन्न सबस्ट्रेट्स को किण्वित करने की क्षमता।

§ एंटीजेनिक गुण।

क्यू जीनोटाइपिक। यह डीएनए की न्यूक्लियोटाइड संरचना और जीनोम की सबसे महत्वपूर्ण विशेषताओं, विशेष रूप से, इसके आकार (आकार, मात्रा, आणविक भार) और अन्य मापदंडों के अध्ययन पर आधारित है। बैक्टीरिया के बीच आनुवंशिक (जीनोमिक) संबंध स्थापित करने का सबसे सटीक तरीका डीएनए होमोलॉजी की डिग्री निर्धारित करना है। जितने अधिक समान जीन होंगे, डीएनए होमोलॉजी की डिग्री उतनी ही अधिक होगी और आनुवंशिक संबंध उतने ही करीब होंगे।

क्यू मिश्रित। यह ध्यान में रखी गई विशेषताओं की सबसे बड़ी संभव संख्या के अनुसार जीवों की तुलना करने के सिद्धांत पर आधारित है, इस धारणा पर कि वे सभी वर्गीकरण के लिए समान हैं।

सूक्ष्मजीवों की परिवर्तनशीलता इस तथ्य की ओर ले जाती है कि एक ही प्रजाति के कुछ लक्षण भिन्न हो सकते हैं। इसलिए . की अवधारणा विकल्प (vars, प्रकार), या इन्फ्रासब-प्रजाति श्रेणियां,सूक्ष्मजीव जो मानक प्रजातियों से कुछ विशेषताओं में भिन्न।तो, वे भेद करते हैं: रूपात्मक ( मोर्फोवर्स ), जैविक ( जैव विविधता ), एंजाइमी ( किण्वक या कीमोवार्स ), एंटीबायोटिक दवाओं और बैक्टीरियोफेज के प्रतिरोध में भिन्न ( रेसिस्टेंसस्वर तथा फागोवार्स ), प्रतिजनी संरचना में भिन्न ( सेरोवर ) और मेजबानों के लिए रोगजनकता ( पटोवर्स ) बैक्टीरिया के प्रकार।

पहचान- सूक्ष्मजीवों और सबसे बढ़कर, उनकी प्रजातियों की उनकी वर्गीकरण स्थिति स्थापित करना। जीवाणु निदान में प्रजातियों का निर्धारण एक निर्णायक क्षण है संक्रामक रोग. अक्सर पहचान के लिए रोगजनक जीवाणुउनके रूपात्मक, टिंक्टोरियल, सांस्कृतिक, जैव रासायनिक और एंटीजेनिक गुणों का अध्ययन करें।

तनावएक विशिष्ट स्रोत से अलग संस्कृति को बुलाओ, या उसी से अलग-अलग समय पर स्रोत।उपभेदों को या तो प्रोटोकॉल संख्या या अलगाव के स्रोत (मानव, पशु, बाहरी वातावरण), या उस क्षेत्र (शहर) द्वारा जहां इसे आवंटित किया गया था। एक प्रजाति की तुलना में एक तनाव एक संकीर्ण अवधारणा है।

क्लोनएक एकल कोशिका (एकल कोशिका संस्कृति) से पृथक सूक्ष्मजीव की संस्कृति कहा जाता है।

शुद्ध संस्कृतिएक ठोस पोषक माध्यम पर उगाई गई एक अलग कॉलोनी से उगाई गई एक ही प्रजाति का एक माइक्रोबियल नमूना है।

के अनुसार बाइनरी (द्विपद) नामकरण प्रत्येक सूक्ष्मजीव का एक नाम होता है जिसमें दो शब्द होते हैं: पहला शब्द का अर्थ है जीनस और एक बड़े अक्षर के साथ लिखा जाता है, दूसरे शब्द का अर्थ है प्रजाति और एक छोटे अक्षर के साथ लिखा जाता है।

उदाहरण के लिए, इशरीकिया कोली .

न्यूमोकोकोकी

फर्मिक्यूट्स, स्ट्रेप्टोकोकेसी, स्ट्रैपटोकोकस एक समूह के अंतर्गत आता है पाइोजेनिक कोक्सी, क्योंकि वे कहते हैं प्युलुलेंट-भड़काऊ प्रक्रियाएं अलग स्थानीयकरण . प्रतिनिधित्व करता है सशर्त रूप से रोगजनक माइक्रोफ्लोराऊपरी श्वसन पथ (नासोफरीनक्स).

एस. निमोनियाडिप्लोकॉसी का एक लांसोलेट रूप है, जो एक पॉलीसेकेराइड कैप्सूल (पैथोलॉजिकल सामग्री से स्मीयर में) में संलग्न है। यह है फेफड़े के ऊतकों के लिए उष्ण कटिबंधविशेष चिपकने की उपस्थिति के कारण।

कैप्सूल का नैदानिक ​​​​मूल्य है. पॉलीसेकेराइड कैप्सुलर एंटीजन के अनुसार, हैं 84 सीरोटाइप(टाइप-विशिष्ट एंटीजन)। यह प्रतिजन है सुरक्षात्मक।लेंसफील्ड योजना के लिए एस. निमोनियाछोड़ा गया।

झिल्ली हानिकारक विष न्यूमोलिसिन(ओ-स्ट्रेप्टोलिसिन का एनालॉग)(एरिथ्रोसाइट्स का आसमाटिक लसीका)। सिलिअटेड एपिथेलियम के सिलिया को नष्ट कर देता है। ?एम प्रोटीनतथा पॉलीसेकेराइड कैप्सूलफागोसाइटोसिस और आसंजन के लिए प्रतिरोध प्रदान करें। कैप्सूल रोगजनकता का मुख्य कारक है। कैप्सुलर न्यूमोकोकी एविरुलेंट हैं। कैप्सूल विषाक्त है और पूरक को सक्रिय करता है। ?पदार्थ सी- कोशिका भित्ति का टेकोइक एसिड, जिसमें कोलीन होता है और इसके साथ परस्पर क्रिया करता है सी - रिएक्टिव प्रोटीन भड़काऊ प्रतिक्रियाओं को उत्तेजित करके। विभिन्न एंजाइम - हयालूरोनिडेस, पेप्टिडेज़ सेक्रेटरी आईजी एऔर दूसरे।

कैप्नोफाइल्स(5-10% सीओ 2), वैकल्पिक अवायवीय, मेसोफाइल, पोषक मीडिया पर मांग (रक्त अगर, हृदय-मस्तिष्क मीडिया, एरिथ्रिटोल अगर पर अच्छी तरह से विकसित)। खून पर आंशिक हेमोलिसिस के साथ छोटी चमकदार कॉलोनियां।

1. कैटेलेज नेगेटिव(पारिवारिक परीक्षण); 2. हेमोलिटिक रूप से सक्रिय (?-हेमोलिसिस). 3. मूल प्रजाति परीक्षण: किण्वन इनुलिन, मीडिया पर 10% पित्त के साथ लसीका, ऑप्टोचिन के प्रति संवेदनशीलता।

शोध सामग्रीन्यूमोकोकल संक्रमण के रूप पर निर्भर करता है (वाहकों की पहचान करने के लिए थूक, रक्त, मवाद, ग्रसनी की सूजन)। 1. एक्सप्रेस तरीके(रोग सामग्री में रोगज़नक़ का पता लगाना): सूक्ष्मदर्शी द्वारा परीक्षण(ग्राम और के अनुसार) बुरी गिंसु); पॉलीवलेंट एंटीकैप्सुलर सीरम के साथ उपचार के दौरान "कैप्सूल सूजन" की प्रतिक्रिया। रोग संबंधी सामग्री (आरएसके, आरआईएफ) में एंटीजन का पता लगाना। 2. बैक्टीरियोलॉजिकल विधि(एक मोमबत्ती के साथ एक desiccator में खेती की जाती है)। 3. सीरोलॉजिकल विधि(एंटीकैप्सुलर एंटीबॉडी निर्धारित करें)। 4. जैविक नमूना(थूक के साथ सफेद चूहों का इंट्रापेरिटोनियल संक्रमण)।

ठीक - ऊपरी वायुमार्ग में दृढ़ता. पर कमजोर प्रतिरक्षानिचले श्वसन पथ में प्रवेश करें, और वहाँ है अंतर्जात संक्रमण. अतिसंवेदनशील लोगों के वायुजनित संक्रमण की संभावना - बहिर्जात संक्रमण. श्वसन पथ का संक्रमण अक्सर तब होता है जब वायरल संक्रमण के दौरान उनकी अखंडता का उल्लंघन होता है (तीव्र श्वसन वायरल संक्रमण की पृष्ठभूमि के खिलाफ माध्यमिक संक्रमण के रूप में बैक्टीरियल निमोनिया)। न्यूमोकोकल एटियलजि के रोग- निमोनिया, मेनिनजाइटिस, ओटिटिस, नेत्रश्लेष्मलाशोथ, सेप्सिस, आदि।

संक्रमण का स्रोत बीमारतथा जीवाणु वाहक. प्रवेश द्वार - श्लेष्मा झिल्ली. स्थानांतरण तंत्र - संपर्क, वायुजन्य.

अत्यधिक शुद्ध से बने टीके कैप्सुलर पॉलीसेकेराइड्ससबसे रोगजनक सीरोटाइप। रोग प्रतिरोधक क्षमता - प्रकार-विशिष्ट। गैर-दूषित पदार्थों (रक्त, फुफ्फुस द्रव) के अध्ययन में, रोगज़नक़ और उसके प्रतिजनों की पहचान करने के तथ्य के आधार पर एटियलॉजिकल निदान स्थापित किया जा सकता है। दूषित सामग्री (थूक) की जांच करते समय, यह ध्यान में रखा जाना चाहिए कि पृथक न्यूमोकोकस ऊपरी श्वसन पथ का एक सहभागी हो सकता है और यह निमोनिया है पॉलीएटियोलॉजिकल रोग. निम्नलिखित मानदंडों को ध्यान में रखते हुए, विधियों के एक सेट का उपयोग करके एक सटीक निदान स्थापित किया जा सकता है: पी। का एक नैदानिक ​​​​एकाग्रता में अलगाव (10 5 / एमएल) थूक से, युग्मित रोगी सीरा में सेरोकोनवर्जन, पी। का रक्त से अलगाव या फुफ्फुस द्रव।

ऑर्थोमिक्सोवायरस

परिवार ऑर्थोमिक्सोविरिडि प्रसव इन्फ्लूएंजा वायरस ए, बीतथा इन्फ्लूएंजा वायरस सी, जो एक दूसरे से भिन्न हैं न्यूक्लियोप्रोटीन एंटीजन के लिए: एन टाइप ए वायरस एन टाइप बी वायरस एन टाइप सी वायरस ?टाइप सी वायरस एक अलग जीनस में पृथक है, क्योंकि 7 आरएनए टुकड़े,कोई न्यूरोमिनिडेज़ नहीं, कोई एंटीजेनिक भिन्नता नहीं (बहाव और बदलाव),सेल पर सोखने के लिए एक अलग प्रकार के रिसेप्टर का उपयोग किया जाता है जीवन चक्र साइटोप्लाज्म में शुरू होता है, नाभिक में जीनोम का संश्लेषण होता है।

विरियन है गोलाकार आकृति, व्यास 80-120 एनएम, जटिल वायरस ( सुपरकैप्सिड), समरूपता प्रकार - कुंडली. जीनोम से बना होता है 8 टुकड़े शाही सेनातथा 4 कैप्सिड प्रोटीन: 1. न्यूक्लियोप्रोटीन(एनपी), प्रकार-विशिष्ट, एक संरचनात्मक और नियामक भूमिका निभाता है 2. ट्रांसक्रिपटेस (आरएनए पोलीमरेज़) 3. एंडोन्यूक्लिएज 4. प्रतिकृति सुपरकैप्सिड है दो ग्लाइकोप्रोटीन , जो सतह के स्पाइक्स का हिस्सा हैं: 1. hemagglutinin 2. न्यूरोमिनिडेस इन्फ्लूएंजा वायरस हेमाग्लगुटिनिन के मुख्य कार्य: 1) मान्यतासंवेदनशील कोशिकाएं (सियालिक एसिड के साथ लेपित ऊपरी डीटी की कोशिकाएं); 2) विलयनकोशिका झिल्ली के साथ 3) वायरस महामारी(हेमाग्लगुटिनिन परिवर्तन महामारी का कारण है, इसकी परिवर्तनशीलता इन्फ्लूएंजा महामारी का कारण है); 4) प्रतिरक्षा का गठन. इन्फ्लुएंजा मनुष्यों, स्तनधारियों और पक्षियों के एक वायरस में 13 एंटीजेनिक प्रकार के हेमाग्लगुटिनिन होते हैं ( एच1-एच13). न्यूरोमिनिडेस के कार्य: 1) विषाणुओं का प्रसार; 2) महामारी और महामारी गुणवाइरस। इन्फ्लुएंजा ए वायरस में न्यूरोमिनिडेस के 10 अलग-अलग प्रकार हैं ( N1-N10) इस तरह, अभिलक्षणिक विशेषताटाइप ए इन्फ्लुएंजा वायरस प्रतिजनों की उच्च परिवर्तनशीलता एचतथा एन।रचना में सभी प्रकार के मानव इन्फ्लूएंजा वायरस प्रकार ए 3 एच और 2 एन शामिल हैं। उनके संयोजन के आधार पर, तीन उपप्रकार प्रतिष्ठित हैं H1N1, H2N2, H3N2. परिवर्तनशीलता देय है दो आनुवंशिक प्रक्रियाएं. बहती – ग्लाइकोप्रोटीन में छोटे परिवर्तनजो दिए गए उपप्रकार (जीन के बिंदु उत्परिवर्तन के कारण) से परे वायरस के तनाव को दूर नहीं करते हैं। बदलाव (कूद) - परिभाषित करता है प्रतिजनों का पूर्ण प्रतिस्थापनजिसके परिणामस्वरूप वायरस का एक नया उपप्रकार होता है (मानव, पशु और पक्षी वायरस के बीच पुनर्संयोजन के कारण जीन प्रतिस्थापन)। प्रकार सी - स्थिर। टाइप बी - बहाव कम स्पष्ट है, कोई बदलाव नहीं है।

इन्फ्लूएंजा वायरस गर्मी के प्रति संवेदनशील है (65 डिग्री सेल्सियस पर यह 5-10 मिनट के भीतर मर जाता है), सुखाने, सूरज की रोशनी के संपर्क में, कमरे के तापमान पर कुछ घंटों में मर जाता है, और आसानी से कीटाणुनाशक से बेअसर हो जाता है।

टाइप ए वायरस मनुष्यों, स्तनधारियों और पक्षियों में इन्फ्लूएंजा का कारण बनता है, जबकि टाइप बी और टाइप सी वायरस केवल मनुष्यों में होता है। टाइप ए वायरस महामारी और महामारी का कारण बनता है, टाइप बी वायरस महामारी और स्थानीय प्रकोप का कारण बनता है, टाइप सी वायरस केवल छिटपुट मामलों का कारण बनता है संक्रमण का स्रोत - केवल व्यक्ति, बीमार या वाहक. संक्रमण का मार्ग हवाई. ऊष्मायन अवधि बहुत कम है - कई घंटों से 2 दिनों तक। प्रतिरक्षा इन्फ्लूएंजा महामारी का मुख्य नियामक है।

शोध सामग्री है: नासोफेरींजल डिस्चार्ज (या तो फ्लशिंग या कॉटन-गॉज स्वैब का उपयोग करके प्राप्त किया जाता है), नाक म्यूकोसा, रक्त और अनुभागीय सामग्री के स्वैब-निशान। 1. एक्सप्रेस डायग्नोस्टिक्स: सीधा रीफया एलिसा(रोगियों के नासोफरीनक्स से स्मीयर-छापों में या स्वैब में वायरल एंटीजन का पता लगाएं)। 2. वायरोलॉजिकल: संक्रमण 10-11 दिन पुराना चिकन भ्रूण(एमनियोटिक गुहा में बेहतर)। एमनियोटिक गुहा की सामग्री में वायरस का पता लगाया जाता है (संकेत) आरजीएमुर्गियों, गिनी सूअरों और 0-रक्त समूहों के एरिथ्रोसाइट्स का उपयोग करें। के साथ वायरस की पहचान करें आरटीजीएविशिष्ट सीरम का उपयोग करना। 3. सीरोलॉजिकल विधि: विशिष्ट एंटीबॉडी और उनके अनुमापांक में न्यूनतम 4 गुना वृद्धि (युग्मित सीरा में) का उपयोग करके पता लगाया जाता है आरटीजीए, आरएसके, आईएफए। इन्फ्लुएंजा टाइप वायरसबीऊतक संस्कृतियों में सुसंस्कृत किया जा सकता है।

1) क्षीण विषाणु से जीना 2) पूरे विरियन को मार डाला 3) सबविरियन वैक्सीन(विभाजित विषाणुओं से) 4) सबयूनिटकेवल हेमाग्लगुटिनिन और न्यूरोमिनिडेस युक्त टीका। 6 महीने से बच्चे। 12 साल तक, डब्ल्यूएचओ की सिफारिश के अनुसार, कम से कम प्रतिक्रियाशील और विषाक्त ("ग्रिपपोल") के रूप में केवल एक सबयूनिट वैक्सीन के साथ टीका लगाया जाना चाहिए।

रूसी संघ के स्वास्थ्य मंत्रालय कज़ान राज्य चिकित्सा विश्वविद्यालय माइक्रोबायोलॉजी विभाग

न्यूमोकॉकिस

कज़ान 1999

यूडीसी 576.851.21(07)

कज़ान राज्य चिकित्सा विश्वविद्यालय के केंद्रीय समन्वय और पद्धति परिषद के निर्णय द्वारा प्रकाशित।

द्वारा संकलित:

(सूक्ष्म जीव विज्ञान विभाग के प्रमुख, चिकित्सा विज्ञान के डॉक्टर, प्रोफेसर ओ.के. पॉज़डीव, माइक्रोबायोलॉजी विभाग के सहायक, पीएच.डी., ईआर फेडोरोवा।

समीक्षक:

महामारी विज्ञान विभाग के प्रमुख, कज़ान राज्य चिकित्सा विश्वविद्यालय, चिकित्सा विज्ञान के डॉक्टर, एसोसिएट प्रोफेसर एम.एस. शफीव, कज़ान राज्य चिकित्सा अकादमी के महामारी विज्ञान विभाग के प्रमुख, चिकित्सा विज्ञान के डॉक्टर, प्रोफेसर वी.ई. ग्रिगोरिएव।

न्यूमोकोकी / ओ.के. पॉज़्डीव, ई.आर. फेडोरोव-कज़ान: केएसएमयू, 1999। - 14 एस।

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कज़ान स्टेट मेडिकल यूनिवर्सिटी, 1999

न्यूमोकोकस (स्ट्रेप्टोकोकस न्यूमोनिया) को पहली बार पाश्चर (1881) ने रेबीज के टीके पर काम करते हुए पहचाना था और शुरू में इसे रेबीज का प्रेरक एजेंट माना जाता था। मनुष्यों में निमोनिया के विकास में सूक्ष्मजीव की एटिऑलॉजिकल भूमिका फ्रेनकेल और वीचसेलबौम (1884) द्वारा सिद्ध की गई थी। बैक्टीरिया मानव और पशु जीवों का उपनिवेश करते हैं और तथाकथित "मौखिक" स्ट्रेप्टोकोकी के समूह में शामिल हैं। वे निमोनिया के मुख्य प्रेरक एजेंट हैं, वे फुफ्फुस, मेनिन्जाइटिस, रेंगने वाले कॉर्नियल अल्सर, मध्य कान की शुद्ध सूजन, सेप्टिक स्थितियों और अन्य बीमारियों का कारण बन सकते हैं। बर्गी बैक्टीरिया की (1994) के IX संस्करण में, न्यूमोकोकी को 17वें समूह "ग्राम-पॉजिटिव कोक्सी" में शामिल किया गया है।

घावों की महामारी विज्ञान। न्यूमोकोकस अस्पतालों के बाहर पंजीकृत बैक्टीरियल निमोनिया के मुख्य प्रेरक एजेंटों में से एक है (प्रति 1000 लोगों पर 2-4 मामले); दुनिया में हर साल न्यूमोकोकल निमोनिया के कम से कम 500,000 मामले देखे जाते हैं (वास्तविक मूल्य बहुत अधिक है)। बच्चों और बुजुर्गों में संक्रमण की आशंका सबसे अधिक होती है। संक्रमण का भंडार रोगी और वाहक (पूर्वस्कूली बच्चों का 20-50% और वयस्कों का 20-25%) है; संचरण का मुख्य मार्ग संपर्क है; प्रकोप के दौरान भी हवाई। चरम घटना ठंड के मौसम में होती है। अधिकांश मामलों में नैदानिक ​​रूपसंक्रमण तब विकसित होता है जब शरीर का प्रतिरोध बिगड़ा होता है (ठंडे तनाव के कारण), साथ ही साथ अन्य विकृति की पृष्ठभूमि के खिलाफ (सिकल सेल एनीमिया, हॉजकिन रोग। एचआईवी संक्रमण, मायलोमा, मधुमेह, स्प्लेनेक्टोमी के बाद की स्थिति, आदि) या शराब। प्रकार 1, 2, और 3 वयस्कों में विकृति विज्ञान में सबसे बड़ा महामारी विज्ञान महत्व निभाते हैं; बच्चों में - 1, 2, 3 और 14 विकल्प। सेरोवरों का अवरोही क्रम में विषाणु - 3, 1, 2, 5, 7 और 8 विकल्प। सफेद चूहे न्यूमोकोकी के प्रति संवेदनशील होते हैं (संक्रमित होने पर, वे एक दिन के भीतर सेप्टीसीमिया से मर जाते हैं), बछड़े, भेड़ के बच्चे, सूअर, कुत्ते और बंदर।

आकृति विज्ञान। न्यूमोकोकी स्थिर होते हैं, वे बीजाणु नहीं बनाते हैं, उनके पास थोड़ा लम्बा आकार होता है, जो मोमबत्ती की लौ की आकृति जैसा दिखता है। नैदानिक ​​सामग्री के स्मीयर में, उन्हें जोड़े में व्यवस्थित किया जाता है, जिनमें से प्रत्येक एक मोटे कैप्सूल से घिरा होता है। संस्कृति मीडिया से स्मीयर में, वे छोटी श्रृंखलाओं में स्थित हो सकते हैं और अधिक गोल हो सकते हैं। साधारण मीडिया पर, वे एक पतली कैप्सूल बनाते हैं; इसका विकास रक्त, सीरम या जलोदर द्रव की शुरूआत से प्रेरित होता है। टाइप III बैक्टीरिया में कैप्सूल का निर्माण सबसे अधिक स्पष्ट है। जंजीरों में व्यवस्थित होने पर, कैप्सूल सामान्य हो सकता है।

सांस्कृतिक गुण। न्यूमोकोकी एरोबेस या वैकल्पिक अवायवीय; खेती के दौरान, कैपनोफिलिक स्थितियों (5-10% CO2) को प्राथमिकता दी जाती है। रक्त या सीरम मीडिया पर केमोऑर्गनोग्रॉफी और अच्छी तरह से विकसित होता है, जो 0.1% ग्लूकोज के अतिरिक्त द्वारा पूरक होता है। वे 28-42 डिग्री सेल्सियस की तापमान सीमा में बढ़ सकते हैं, इष्टतम 37 डिग्री सेल्सियस है। इष्टतम पीएच -7.6-7.8। घने मीडिया पर, वे लगभग 1 मिमी के व्यास के साथ नाजुक पारभासी, अच्छी तरह से परिभाषित कॉलोनियां बनाते हैं। कभी-कभी वे केंद्रीय इंडेंटेशन के साथ फ्लैट हो सकते हैं; अन्य स्ट्रेप्टोकोकी की तरह, कालोनियों का कभी विलय नहीं होता है

आपस में। रक्त अगर पर, वे हरे-भूरे रंग के छोटे पारभासी उपनिवेश बनाते हैं। उपनिवेशों का केंद्र गहरा है, परिधि हल्की है। कॉलोनी के नीचे और इसकी परिधि के साथ, एक हेमोलिसिस का एक क्षेत्र हरे रंग के फीके पड़े क्षेत्र के रूप में दिखाई देता है (हीमोग्लोबिन के मेथेमोग्लोबिन में संक्रमण के कारण)। प्रकार III न्यूमोकोकस की कालोनियों में अक्सर एक श्लेष्म स्थिरता होती है, उनका आकार 2 मिमी तक होता है। वे अस्पष्ट हैं, मैं एक दूसरे के साथ विलय कर सकता हूं। वे कॉलोनियों के S- और R- रूप बनाते हैं। एस- से आर-फॉर्म में संक्रमण के दौरान, वे एक कैप्सूल को संश्लेषित करने की क्षमता खो देते हैं। सीरम और 0.2% ग्लूकोज के साथ तरल मीडिया पर एक समान मैलापन और एक छोटा सा फ्लोकुलेंट अवक्षेप देता है। लंबे समय तक खेती के साथ, तलछट बढ़ जाती है।

वहनीयता। न्यूमोकोकी अस्थिर सूक्ष्मजीवों के समूह से संबंधित है। शुष्क थूक में, वे दो महीने तक बने रहते हैं। कम तापमान पर लंबे समय तक संग्रहीत किया जा सकता है; 60 डिग्री सेल्सियस के तापमान पर, वे 3-5 मिनट के भीतर मर जाते हैं। कार्बोलिक एसिड का 3% घोल उन्हें 1-2 मिनट में मार देता है। ऑप्टोचिन (1:100,000 की सांद्रता पर) और पित्त न्यूमोकोकी के लिए हानिकारक हैं, जिसका उपयोग बैक्टीरिया की पहचान करने के लिए किया जाता है।

न्यूमोकोकी कई गुणों (तालिका 1) में अन्य सूक्ष्मजीवों से भिन्न होता है।

तालिका 1 न्यूमोकोकी के जैव रासायनिक गुण

टेस्ट सब्सट्रेट	परिणाम	टेस्ट सब्सट्रेट	परिणाम
100°C . पर वृद्धि
		रैफिनोज
6.5% Nad . के साथ मध्यम
ए-हेमोलिसिस
बी-हेमोलिसिस		ट्रेहलोस
		फॉस्फेट
हिपपुरेट		β-galactosidase
ग्लिसरॉल
पदनाम: "+" - 90% या अधिक उपभेद सकारात्मक हैं; (+) - 80-89% स्ट्रेन सकारात्मक हैं; डी - 21-79% उपभेद सकारात्मक हैं; (-) - 11-20% स्ट्रेन सकारात्मक हैं; "- - 90% या अधिक उपभेद नकारात्मक हैं।

एंटीजेनिक संरचना। न्यूमोकोकी में कई प्रकार के प्रतिजन पाए गए हैं: एक पॉलीसेकेराइड, कोशिका भित्ति में स्थित 0-दैहिक प्रतिजन; पॉलीसेकेराइड कैप्सुलर के-एंटीजन और एम-प्रोटीन। पॉलीसेकेराइड दैहिक प्रतिजन अन्य स्ट्रेप्टोकोकी के सी-पदार्थ के समान है। संबंध choline फॉस्फेट से जुड़े राइब्यूटिचोइक एसिड की रासायनिक संरचना की समानता को निर्धारित करता है। कैप्सुलर एंटीजन में एक पॉलीसेकेराइड प्रकृति भी होती है, जिसमें विभिन्न संयोजनों में दोहराए गए मोनोसेकेराइड होते हैं: डी-ग्लूकोज, डी-गैलेक्टोज और एल-रमनोज। कैप्सुलर एंटीजन की संरचना के अनुसार, न्यूमोकोकी को 84 सेरोवर में विभाजित किया जाता है। यह याद रखना चाहिए कि कैप्सुलर एंटीजन एंटीसेरा के साथ समूह ए और बी स्ट्रेप्टोकोकल एंटीजन के साथ-साथ सेरा के साथ क्लेबसिएला और एस्चेरिचिया एंटीजन के साथ क्रॉस-प्रतिक्रिया करते हैं। एस से आर-फॉर्म में संक्रमण के दौरान, कैप्सुलर एंटीजन खो जाते हैं। न्यूमोकोकल सीरोटाइपिंग के लिए, समूह सीरा का उत्पादन किया जाता है, जो लैटिन अक्षरों (ए, बी, सी, डी, आदि) और सेरोवेरिएंट द्वारा दर्शाया जाता है, जो रोमन अंकों द्वारा दर्शाया जाता है। एग्लूटीनेटिंग सीरम III सीरम मिश्रण में शामिल नहीं है। इसे अलग से जारी किया जाता है और इसे नस्ल नहीं किया जा सकता है। मनुष्यों में, I, II और III सीरोटाइप के न्यूमोकोकी अक्सर अलग-थलग होते हैं। वे मनुष्यों के लिए सबसे अधिक विषैले होते हैं, इसलिए एग्लूटिनेशन प्रतिक्रिया शुरू में इन प्रकारों के लिए एंटीसेरा का उपयोग करके निर्धारित की जाती है। यदि परिणाम नकारात्मक है, तो एग्लूटिनेशन प्रतिक्रिया को सीरा ए, बी, सी, आदि के मिश्रण के साथ रखा जाता है। (सकारात्मक परिणाम प्राप्त होने तक), और फिर अलग एंटीसेरा के साथ। सेरोवार्स की तेजी से पहचान के लिए, नेफेल्ड प्रतिक्रिया (कैप्सूल की प्रतिरक्षा सूजन) का उपयोग किया जाता है। विधि समरूप प्रतिसेरम की उपस्थिति में मात्रा में वृद्धि करने के लिए न्यूमोकोकल कैप्सूल की क्षमता पर आधारित है, जिसे प्रकाश-ऑप्टिकल माइक्रोस्कोपी द्वारा दर्ज किया जाता है। कैप्सुलर पॉलीसेकेराइड में संवेदनशील गुण होते हैं, जो त्वचा परीक्षणों का उपयोग करके पता लगाए गए विलंबित प्रकार की अतिसंवेदनशीलता प्रतिक्रिया के विकास में प्रकट होते हैं।

रोगजनकता कारक। मुख्य कारक कैप्सूल है, जो बैक्टीरिया को फागोसाइट्स की सूक्ष्मजीवी क्षमता से बचाता है और उन्हें ऑप्सोनिन की क्रिया से दूर ले जाता है। गैर-एनकैप्सुलेटेड उपभेद व्यावहारिक रूप से प्रतिकूल हैं और दुर्लभ हैं। न्यूमोकोकल एटी के अधिकांश पूल एटी टू एजी कैप्सूल हैं। महत्वपूर्ण कार्यकैप्सूल और एम-प्रोटीन म्यूकोसा पर आसंजन सुनिश्चित करने के लिए भी है। पदार्थ-सी, जो विशेष रूप से सी-रिएक्टिव प्रोटीन के साथ परस्पर क्रिया करता है, आवश्यक है। इस तरह की प्रतिक्रिया का परिणाम पूरक कैस्केड की सक्रियता और सूजन के तीव्र चरण के मध्यस्थों की रिहाई है; फेफड़े के ऊतकों में उनका संचय पॉलीमोर्फोन्यूक्लियर फागोसाइट्स के प्रवास को उत्तेजित करता है। शक्तिशाली भड़काऊ घुसपैठ का गठन फेफड़े के ऊतकों के होमोस्टैसिस के उल्लंघन और इसके हेपेटाइजेशन के साथ होता है। न्यूमोकोकी एंडोटॉक्सिन, ए- और बी-हेमोलिसिन (न्यूमोलिसिन), ल्यूकोसिडिन का उत्पादन करता है। ए-न्यूमोलिसिन एक थर्मोलैबाइल प्रोटीन है जो 0-स्ट्रेप्टोलिसिन को निष्क्रिय करने में सक्षम है,

एरिथ्रोजेनिक पदार्थ, न्यूरोमिनिडेज़। न्यूमोकोकी कई एंजाइमों को भी संश्लेषित करता है जो घावों के रोगजनन में योगदान करते हैं - मुरामिडेस, हाइलूरोनिडेस (ऊतकों में सूक्ष्मजीवों के प्रसार को बढ़ावा देता है), पेप्टिडेज़ (आईजीए को साफ करता है)।

घावों का रोगजनन। न्यूमोकोकी का बायोटोप ऊपरी श्वसन पथ है। अधिकांश निमोनिया के रोगजनन में एस न्यूमोनिया युक्त लार की आकांक्षा और निचले वायुमार्ग में बैक्टीरिया का प्रवेश शामिल है। सुरक्षात्मक जल निकासी तंत्र का उल्लंघन - खांसी का झटका और श्लेष्मा निकासी आवश्यक है। वयस्कों में, फेफड़े के लोबार घाव अधिक बार देखे जाते हैं, बच्चों और बुजुर्गों में, पेरिब्रोनचियल या फोकल घाव हावी होते हैं। शक्तिशाली भड़काऊ घुसपैठ का गठन फेफड़े के ऊतकों के होमोस्टैसिस के उल्लंघन और इसके हेपेटाइजेशन के साथ होता है। फेफड़े के पैरेन्काइमा में गुहाओं के गठन के साथ सबसे अधिक विषैले सेरोवर 3 के संक्रमण हो सकते हैं। प्राथमिक फोकस से, रोगज़नक़ फुफ्फुस गुहा और पेरीकार्डियम में प्रवेश कर सकता है या हेमटोजेनस रूप से फैल सकता है और मेनिन्जाइटिस, एंडोकार्डिटिस और आर्टिकुलर घावों का कारण बन सकता है।

नैदानिक ​​अभिव्यक्तियाँ। क्लासिक न्यूमोकोकल निमोनिया अचानक शुरू होता है; शरीर के तापमान में वृद्धि, उत्पादक खांसी और सीने में दर्द पर ध्यान दें। दुर्बल व्यक्तियों और बुजुर्गों में, रोग धीरे-धीरे विकसित होता है, हल्का बुखार, बिगड़ा हुआ चेतना, और फुफ्फुसीय हृदय विफलता के लक्षण। स्ट्रेप्टोकोकल मेनिन्जाइटिस सभी आयु समूहों में दर्ज किया गया है; उन्हें शरीर के तापमान में वृद्धि, गर्दन की मांसपेशियों की कठोरता, सिरदर्द, मतली और उल्टी के साथ एक हिंसक शुरुआत की विशेषता है। मेनिन्जियल संवहनी घाव अक्सर चेतना के नुकसान के साथ होते हैं; बच्चों और वृद्धावस्था में मृत्यु दर 80% तक पहुंच सकती है। हेमटोजेनस न्यूमोकोकल घाव, साथ ही साइनसाइटिस, मास्टोइडाइटिस, ओटिटिस मीडिया, एंडोकार्डिटिस और पेरिटोनिटिस, प्रतिरक्षाविज्ञानी व्यक्तियों (जैसे, एचआईवी संक्रमित) या स्प्लेनेक्टोमी वाले रोगियों में काफी आम हैं। बीमारी के बाद, अस्थिर प्रतिरक्षा विकसित होती है, जो प्रकृति में टाइप-विशिष्ट होती है और विशिष्ट कैप्सुलर पॉलीसेकेराइड के खिलाफ एंटीबॉडी की उपस्थिति के कारण होती है।

इलाज। न्यूमोकोकल संक्रमण के लिए चिकित्सा का आधार एंटीबायोटिक्स हैं - पेनिसिलिन, टेट्रासाइक्लिन, लेवोमाइसेटिन, वैनकोमाइसिन, रिफैम्पिसिन, सेफ्ट्रिएक्सोन।

निवारण। न्यूमोकोकल संक्रमणों की गैर-विशिष्ट रोकथाम का उद्देश्य रोगियों और वाहकों को उनके बाद के उपचार के साथ पहचानना है। संक्रमण की विशिष्ट रोकथाम के लिए, दो वर्ष से अधिक उम्र के बच्चों, जोखिम वाले वयस्कों के साथ-साथ बीमारी के प्रकोप के दौरान स्वस्थ व्यक्तियों को पॉलीवलेंट पॉलीसेकेराइड वैक्सीन न्यूमोवेक्स 23 का टीका लगाया जाता है। दवा में 23 न्यूमोकोकल कैप्सुलर पॉलीसेकेराइड एंटीजन (1, 2, 3, 4, 5, 6B 7F, 8, 9N, 9V, 10A, 11A, 12F, 14, 15B, 17F, 18C, 1-9F, 19A, 20, शामिल हैं। 22 एफ, 23 एफ, 33 एफ)। एंटीजन

न्यूमोकोकी संयुक्त राज्य अमेरिका में आक्रामक न्यूमोकोकल संक्रमण वाले रोगियों के रक्त से पृथक 90% उपभेदों से प्राप्त किया गया था और रूस में सामने आने वाले उपभेदों के अनुरूप था। 5-8 साल के अंतराल के साथ दो बार टीकाकरण किया जाता है।

टीकाकरण के बाद, कृत्रिम, सक्रिय, प्रकार-विशिष्ट प्रतिरक्षा बनाई जाती है।

प्रयोगशाला निदान। "स्वर्ण मानक" रोगज़नक़ का अलगाव है। यह याद रखना चाहिए कि सामग्री की जल्दी से जांच की जानी चाहिए, क्योंकि। इंट्रासेल्युलर एंजाइम की गतिविधि के कारण बैक्टीरिया तेजी से ऑटोलिसिस के लिए प्रवण होते हैं। अध्ययन के लिए सामग्री थूक, फुफ्फुस बहाव और अन्य एक्सयूडेट्स, मस्तिष्कमेरु द्रव, रक्त, नाक और गले से बलगम, आंखों के अल्सर से निर्वहन, कान, मूत्र, अंगों के टुकड़े (रोगी की मृत्यु के मामले में) से मुक्ति है। . न्यूमोकोकल संक्रमण के लिए एक संकेत प्रतिक्रिया जारी की जा सकती है यदि थूक स्मीयरों में न्यूट्रोफिल और ग्राम-पॉजिटिव लैंसोलेट डिप्लोकॉसी का पता लगाया जाता है (कम से कम 10 प्रति क्षेत्र दृश्य)। अन्यथा, रोगज़नक़ के अलगाव का सहारा लें।

अध्ययन का पहला चरण।रोग संबंधी सामग्री को प्रारंभिक बैक्टीरियोस्कोपी (रक्त को छोड़कर) के अधीन किया जाता है। थूक को एक बाँझ पेट्री डिश में रखा जाता है, धोया जाता है, एक प्यूरुलेंट-श्लेष्म गांठ को एक लूप के साथ पकड़ा जाता है, एक कांच की स्लाइड पर रगड़ा जाता है, सुखाया जाता है और ग्राम के अनुसार दाग दिया जाता है। स्मीयर में, कैप्सूल से घिरे ग्राम-पॉजिटिव लैंसोलेट या अंडाकार आकार के कोक्सी पाए जाते हैं (कैप्सूल का निर्माण केवल बीमार और संक्रमित जानवरों से पृथक न्यूमोकोकी में देखा जाता है)। न्यूमोकोकल कैप्सूल की पहचान Burri-Gins विधि का उपयोग करके की जा सकती है। रोग सामग्री का टीकाकरण 5-10% रक्त या सीरम अगर और संवर्धन माध्यम (8-10% सीरम शोरबा) पर किया जाता है। यदि न्यूमोकोकल सेप्सिस का संदेह है, तो रोगी के रक्त के 5-10 मिलीलीटर को सीरम शोरबा के 45-90 मिलीलीटर में टीका लगाया जाता है। मस्तिष्कमेरु द्रव, यदि यह स्पष्ट है, सेंट्रीफ्यूज किया जाता है और तलछट से कुछ बूंदों को पोषक मीडिया पर टीका लगाया जाता है। अर्ध-तरल सीरम अगर का उपयोग संवर्धन माध्यम के रूप में किया जाता है। संस्कृतियों को 24 घंटे के लिए 37 डिग्री सेल्सियस पर ऊष्मायन किया जाता है। न्यूमोकोकी की शुद्ध संस्कृति को अलग करने का सबसे अच्छा तरीका सफेद चूहों को रोग संबंधी सामग्री से संक्रमित करना है। पेट्री डिश में बाँझ खारा के साथ धोया गया थूक, 1: 2-1: 5 के अनुपात में खारा के साथ एक बाँझ मूसल या टूटे हुए कांच के साथ एक बाँझ मोर्टार में जमीन है। निलंबन तय हो गया है, 0.5-1 मिलीलीटर की मात्रा में सतह पर तैरनेवाला सफेद चूहों को अंतर्गर्भाशयी रूप से प्रशासित किया जाता है। सामग्री में न्यूमोकोकी की उपस्थिति में, चूहे 72 घंटों के भीतर मर जाते हैं। अंगों और रक्त से स्मीयरों में, विशिष्ट न्यूमोकोकी पाए जाते हैं। रक्त या सीरम अगर के साथ सीरम शोरबा और पेट्री डिश पर अंगों और रक्त को भी सुसंस्कृत किया जाता है।

अध्ययन का दूसरा चरण।पोषक माध्यमों पर वृद्धि की प्रकृति का अध्ययन करें। रक्त अग्र पर, न्यूमोकोकल कॉलोनियां छोटी, गोल, चिकनी होती हैं

किनारों, कोमल, पर्यावरण की हरियाली के क्षेत्र से घिरा हुआ है (जो हरे स्ट्रेप्टोकोकी के विकास की बहुत याद दिलाता है)। सीरम अगर पर, कॉलोनियां कोमल, पारभासी और पारदर्शी होती हैं। ग्राम द्वारा दागे गए स्मीयरों की बैक्टीरियोस्कोपी के साथ। कैप्सूल के बिना ग्राम-पॉजिटिव डिप्लोकॉसी खोजें। बैक्टीरियोस्कोपी के बाद, न्यूमोकोकी के संदिग्ध कॉलोनियों को तिरछा सीरम या रक्त अगर या सीरम शोरबा पर उपसंस्कृत किया जाता है। विभिन्न माइक्रोफ्लोरा के साथ संवर्धन माध्यम से स्मीयर की माइक्रोस्कोपी, जोड़े या छोटी श्रृंखलाओं में व्यवस्थित ग्राम-पॉजिटिव कोक्सी को प्रकट कर सकती है। संवर्धन माध्यम से सामग्री को ठोस पोषक माध्यम में स्थानांतरित किया जाता है। फसलों को 24 घंटे के लिए 37 डिग्री सेल्सियस पर ऊष्मायन किया जाता है।

अध्ययन का तीसरा चरण।रक्त अग्र तिरछा पर, न्यूमोकोकी एक नाजुक, पतली, पारभासी कोटिंग बनाती है। मट्ठा शोरबा पर, न्यूमोकोकी मैलापन और हल्की तलछट का कारण बनता है। सॉलिड कल्चर मीडिया के स्मीयर में, न्यूमोकोकी का एक अलग रूप हो सकता है। मोमबत्ती की लौ के सदृश नुकीले बाहरी सिरों के साथ लम्बी आकृति के डिप्लोकॉसी के साथ, सही अंडाकार और गोल आकार की कोशिकाएँ होती हैं। शोरबा संस्कृति में, न्यूमोकोकी को अक्सर जंजीरों में व्यवस्थित किया जाता है। न्यूमोकोकी के रूपात्मक और सांस्कृतिक गुणों के आधार पर, पौरुष स्ट्रेप्टोकोकी से अंतर करना मुश्किल है, इसलिए, उनके भेदभाव के लिए विशेष परीक्षणों का एक सेट प्रस्तावित किया गया है:

पित्त में घुलनशीलता (डीऑक्सीकोलेट परीक्षण);

इंसुलिन को विघटित करने की क्षमता;

ऑप्टोचिन के प्रति संवेदनशीलता;

विशिष्ट न्यूमोकोकल सेरा के साथ एग्लूटीनेशन प्रतिक्रिया;

ग्लूकोज, माल्टोज, सुक्रोज, लैक्टोज, मैनिटोल, सोर्बिटोल और सैलिसिन को नीचा दिखाने की क्षमता।

सबसे सुलभ तरीके जो न्यूमोकोकी को अन्य स्ट्रेप्टोकोकी से अलग करते हैं, ऑप्टोचिन के साथ एक परीक्षण है (उनके विकास को रोकता है); हरे स्ट्रेप्टोकोकी से वे इनुलिन को किण्वित करने की क्षमता के साथ-साथ पित्त के प्रति संवेदनशीलता से प्रतिष्ठित हैं।

डीऑक्सीकोलेट परीक्षण। प्रारंभिक बैक्टीरियोस्कोपी के बाद, पृथक शुद्ध संस्कृति (अधिमानतः शोरबा) की 10 बूंदों को बाँझ गोजातीय पित्त की 5 बूंदों के साथ एक परखनली में मिलाया जाता है। नियंत्रण एक ऐसी संस्कृति है जिसे खारा की 5 बूंदों के साथ एक परखनली में डाला जाता है। 37 डिग्री सेल्सियस पर ऊष्मायन के 30-60 मिनट के बाद, संस्कृति का पूरा विश्लेषण पित्त के साथ टेस्ट ट्यूब में समाशोधन के रूप में देखा जाता है, मिश्रण नियंत्रण ट्यूब में बादल रहता है। यह याद रखना चाहिए कि न्यूमोकोकस की अविकारी संस्कृतियां पित्त के प्रतिरोधी हैं।

पित्त प्रतिरोध का परीक्षण 10% पित्त शोरबा में टीकाकरण द्वारा भी किया जा सकता है। परीक्षण सामग्री को माध्यम में जोड़ा जाता है, जबकि शोरबा बादल बन जाता है। 37 डिग्री सेल्सियस पर 24 घंटे के ऊष्मायन के बाद, बैक्टीरियल लसीका के परिणामस्वरूप शोरबा को साफ करके न्यूमोकोकी की उपस्थिति का संकेत दिया जाएगा।

आप 20% पित्त के घोल में भीगी हुई डिस्क का भी उपयोग कर सकते हैं। डिस्क को डिश में उगाए गए कल्चर पर रखा जाता है और 37 डिग्री सेल्सियस पर 1-2 घंटे के लिए इनक्यूबेट किया जाता है। न्यूमोकोकी की उपस्थिति में, कालोनियां डिस्क के चारों ओर 1-2 मिमी की दूरी पर लाइस करती हैं।

इनुलिन परीक्षण। न्यूमोकोकस की संस्कृति को माध्यम पर इन्यूलिन के साथ बीजित किया जाता है। ऐसा करने के लिए, 200 मिलीलीटर बाँझ आसुत जल, 18 मिलीलीटर लिटमस टिंचर और 3 ग्राम इनुलिन को 100 मिलीलीटर गोजातीय सीरम में 30 मिनट के लिए 56 डिग्री सेल्सियस पर गर्म किया जाता है, 30 मिनट के लिए बहने वाली भाप से निष्फल किया जाता है। संस्कृतियों को 24 घंटे के लिए 37 डिग्री सेल्सियस पर ऊष्मायन किया जाता है। न्यूमोकोकस इनुलिन को विघटित करता है, जिससे माध्यम लाल हो जाता है। हरा स्ट्रेप्टोकोकस माध्यम के लाल होने का कारण नहीं बनता है।

ऑप्टोचिन के साथ परीक्षण करें। परीक्षण न्यूमोकोकल संस्कृति को 1:100,000 या 1:200,000 के कमजोर पड़ने पर ऑप्टोचिन के साथ सीरम शोरबा में टीका लगाया जाता है। ऐसे वातावरण में न्यूमोकोकस नहीं बढ़ता है। 1:50,000 के कमजोर पड़ने पर ऑप्टोचिन युक्त 10% रक्त अगर पर टीकाकरण द्वारा ऑप्टोचिन के प्रति संवेदनशीलता का निर्धारण करना भी संभव है। नियंत्रण रक्त अगर पर संस्कृति है। न्यूमोकोकी ऑप्टोचिन के साथ माध्यम पर नहीं बढ़ता है, न्यूमोकोकी की वृद्धि नियंत्रण माध्यम पर देखी जाती है। आप ऑप्टोचिन के 6 माइक्रोग्राम के साथ गर्भवती डिस्क का उपयोग कर सकते हैं, जो माध्यम की सतह पर टीकाकरण के बाद लागू होते हैं। न्यूमोकोकी में, डिस्क के चारों ओर कम से कम 18 मिमी व्यास का विकास अवरोध क्षेत्र बनता है।

विषाणु परीक्षण। मट्ठा शोरबा पर उगाए जाने वाले न्यूमोकोकस की दैनिक संस्कृति 1% बाँझ पेप्टोन पानी (पीएच - 7.6) या थोड़ा क्षारीय शोरबा 1:10 तक पतला है। पतला संस्कृति 0.5 मिलीलीटर की मात्रा में 16-20 ग्राम वजन वाले सफेद चूहों को इंट्रापेरिटोनियल रूप से प्रशासित किया जाता है और 72 घंटों तक मनाया जाता है। मृत चूहे के अंगों से पोषक मीडिया पर टीका लगाया जाता है और स्मीयर-छापों की सूक्ष्म जांच की जाती है। अत्यधिक विषाणुजनित संस्कृतियों में न्यूमोकोकी शामिल है, जो 1:10 के कमजोर पड़ने पर संस्कृति की शुरूआत के बाद चूहों की मृत्यु का कारण बनता है। Avirulent संस्कृतियाँ चूहों में मृत्यु का कारण नहीं बनती हैं।

न्यूमोकोकी का सीरोटाइपिंग। साबिन माइक्रोएग्लूटीनेशन प्रतिक्रिया में 18 घंटे की संस्कृति का परीक्षण किया जाता है। न्यूमोकोकल कल्चर की 4 बूंदों को कांच की स्लाइड पर लगाया जाता है। 1 बूंद में टाइप 1 एंटीन्यूमोकोकल सीरम की एक बूंद डालें, दूसरे प्रकार के सीरम में, तीसरे प्रकार के सीरम में - 111, चौथे में - सामान्य सीरम की एक बूंद। कांच पर मिश्रण को एक लूप के साथ मिलाया जाता है और एक आवर्धक कांच के नीचे या कम आवर्धन पर एक माइक्रोस्कोप के तहत जांच की जाती है। एक सकारात्मक मामले में, पहले तीन बूंदों में से एक में एग्लूटिनेशन देखा जाता है। न्यूमोकोकस का प्रकार पहले तीन निश्चित प्रकारों के विशिष्ट एग्लूटीनेटिंग सीरा के साथ एग्लूटीनेशन प्रतिक्रिया में निर्धारित होता है। ऐसी संस्कृतियां जो इस प्रकार के सीरा के साथ नहीं मिलती हैं, उन्हें एक्स-समूह को सौंपा गया है। प्रतिक्रिया निम्नानुसार सेट की गई है। परीक्षण ट्यूबों में 18-घंटे के शोरबा संस्कृति को 0.5 मिलीलीटर में डालें। फिर 1:5 के अनुपात में खारा के साथ पतला सीरम की समान मात्रा में जोड़ें। नियंत्रण 2 टेस्ट ट्यूब होते हैं, जिनमें से एक में मिश्रित टेस्ट कल्चर होता है

सामान्य खरगोश सीरम, और अन्य - केवल परीक्षण संस्कृति। टेस्ट ट्यूब की सामग्री को अच्छी तरह से हिलाया जाता है और 37 डिग्री सेल्सियस के तापमान पर थर्मोस्टैट में 2 घंटे के लिए रखा जाता है, जिसके बाद प्रतिक्रिया की प्रारंभिक गणना की जाती है। अंतिम परिणाम 20 घंटे के लिए कमरे के तापमान पर एक अतिरिक्त ऊष्मायन के बाद नोट किए जाते हैं। एग्लूटिनेशन को चार प्लस स्कोर किया जाता है यदि ट्यूबों की सामग्री पूरी तरह से स्पष्ट होती है और एग्लूटिनेशन कल्चर एक घनी फिल्म है जो हिलने पर नहीं टूटती है; तीन प्लस से अगर, ट्यूब की सामग्री के पूर्ण स्पष्टीकरण के साथ, एग्लूटीनेटिंग संस्कृति आसानी से टुकड़ों में टूट जाती है; दो प्लस - यदि आत्मज्ञान नहीं होता है, तो ट्यूब की बादल सामग्री में एक एग्लूटिनेटेड संस्कृति के कण नग्न आंखों को स्पष्ट रूप से दिखाई देते हैं; एक टेस्ट ट्यूब में एक से अधिक एग्लूटीनेशन के साथ, चिपके हुए न्यूमोकोकी का एक महीन दाने वाला मिश्रण पाया जाता है। आंख को दिखाई देने वाली नकारात्मक प्रतिक्रिया के साथ, एग्लूटिनेशन नहीं देखा जाता है;

झटकों के बाद परखनली की सामग्री एक समान मैलापन है।

समूह . का उपयोग करके एक्स-ग्रुप न्यूमोकोकी की टाइपिंग की जाती है

सेरा जिसमें विशिष्ट एग्लूटीनेटिंग सेरा का मिश्रण होता है

समान मात्रा में। निम्नलिखित समूह सेरा तैयार किया जाता है

undiluted मानक निदान के बराबर मात्रा का मिश्रण

सेरा (लुंड, I960):

ए -1, II, IV, V, XVIII सेरोवर;

बी - VI, VIII, XIX सेरोवर;

सी - सातवीं, एक्सएक्स। XXIV, XXXI, XL सेरोवर;

डी - IX, XI, XVI, XXXVI। XXXVII सेरोवर;

ई - एक्स, XXI। XXXIII, XXXIX सेरोवर;

एफ-बारहवीं। XVII। XXII, XXXVII, XXXII, XLI सेरोवर;

जी - XIII, XXV। XXIX, XXXIV, XXXV, XXXVIII, XLII, XLVII सेरोवर;

जे-XLIII। एक्सएलआईवी, एक्सएलवी, एक्सएलवीआई सेरोवर।

टाइप III एग्लूटीनेटिंग सीरम का उपयोग प्रति सेरा (अन्य विशिष्ट सीरा के साथ मिश्रण के बिना) किया जाता है क्योंकि इसे पर्याप्त रूप से उच्च टिटर में प्राप्त करने में कठिनाई होती है। टाइपिंग दो चरणों में की जाती है: पहले समूह सेरा की मदद से, और फिर समूह के अलग-अलग सीरा के साथ जिसके साथ सकारात्मक प्रतिक्रिया प्राप्त हुई। न्यूमोकोकल सीरोटाइपिंग का उपयोग मुख्य रूप से विशिष्ट सेरोथेरेपी और सेरोप्रोफिलैक्सिस के परिणामों के महामारी विज्ञान के अध्ययन के लिए किया जाता है।

रोगी के थूक से संक्रमित माउस के उदर गुहा से एक्सयूडेट के साथ एंटी-न्यूमोकोकल सेरा को मिलाकर सबिन विधि द्वारा न्यूमोकोकी का माइक्रोग्लगुटिनेशन प्राप्त किया जा सकता है। संक्रमण के चार घंटे बाद, एक्सयूडेट में न्यूमोकोकी की एक शुद्ध संस्कृति पाई जाती है, जो सकारात्मक सबिन एग्लूटिनेशन देती है।

न्यूमोकोकी का पता लगाने और टाइप करने के लिए त्वरित तरीके। 1. न्यूफेल्ड विधि या न्यूमोकोकल कैप्सूल सूजन की घटना। रोगी के ताजा पृथक थूक का एक गांठ तीन पर लगाया जाता है

coverslips, उनमें से प्रत्येक के लिए undiluted विशिष्ट एंटी-न्यूमोकोकल सीरम (1, II, III प्रकार) की एक बूंद और लोफ्लर के नीले रंग की एक बूंद जोड़ें। बूंदों को अच्छी तरह मिलाया जाता है, पेट्रोलियम जेली के साथ किनारों के चारों ओर एक छेद के साथ कांच की स्लाइड के साथ कवर किया जाता है। दो मिनट के बाद, एक विसर्जन प्रणाली के साथ एक माइक्रोस्कोप के तहत लटकती बूंदों की जांच की जाती है। एक सकारात्मक मामले में, न्यूमोकोकल कैप्सूल में तेज वृद्धि देखी जाती है। एक नकारात्मक परिणाम के साथ, कैप्सूल शायद ही पोषित होते हैं। सूजन प्रतिक्रिया विशिष्ट है और अन्य कैप्सुलर बैक्टीरिया के साथ सकारात्मक परिणाम नहीं देती है। मैं इसका उपयोग सल्फोनामाइड्स और एंटीबायोटिक दवाओं के साथ इलाज किए गए रोगियों के थूक के अध्ययन के लिए नहीं करता। इस मामले में, कैप्सुलर न्यूमोकोकी को अलग किया जा सकता है।

2. वर्षा की विधि। गाढ़ा थक्का बनने तक 5-10 मिलीलीटर थूक को पानी के स्नान में उबाला जाता है। थक्का को ट्रिट्यूरेट किया जाता है और न्यूमोकोकी से विशिष्ट पॉलीसेकेराइड निकालने के लिए कुछ मिनटों के लिए फिर से उबाला जाता है, नमकीन की थोड़ी मात्रा डाली जाती है। निलंबन को सेंट्रीफ्यूज किया जाता है, जिसके परिणामस्वरूप वर्षा ट्यूबों में स्पष्ट तरल और विशिष्ट विशिष्ट सीरा होता है, एक रिंग वर्षा प्रतिक्रिया की जाती है। तरल पदार्थों के बीच इंटरफेस में एक अंगूठी की उपस्थिति सकारात्मक परिणाम दर्शाती है।

3. बुर्री के अनुसार न्यूमोकोकल कैप्सूल का निर्धारण। कांच की स्लाइड के अंत में परीक्षण सामग्री की एक बूंद और स्याही की एक बूंद लगाई जाती है। मिश्रण को हिलाया जाता है और एक धब्बा बनाया जाता है, हवा में सुखाया जाता है और, बिना फिक्सिंग के, सूक्ष्म रूप से। दवा की पृष्ठभूमि डार्क स्मोकी है, माइक्रोबियल बॉडीज और उनके कैप्सूल दागदार नहीं हैं। बुर्री के अनुसार बनाई गई तैयारी को निकिफोरोव के मिश्रण के साथ तय किया जा सकता है, पानी से धोया जाता है, त्सिल्या फुकसिन से सना हुआ, 3-5 मिनट के लिए 1: 3 पतला। स्मीयर की अंधेरे पृष्ठभूमि पर, बिना दाग वाले कैप्सूल बाहर खड़े होते हैं, जिसके अंदर एक चमकीले क्रिमसन रंग (जिन्स विधि) के बैक्टीरिया होते हैं।